PrimaCell™人胰腺癌组织源细胞试剂盒 总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。
cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA第一链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证了产品的质量。
蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人关节软骨组织裂解液，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。 产品名称 | PrimaCell™人胰腺癌组织源细胞试剂盒价格 | 英文名称 | | 货号 | EYX99719 |
实验要点及说明； 1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。 运输和保存； 视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满*培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
 操作要点； 1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。 英文名称HumanB1-ARELISAKit人心肌细胞膜B1-AR规格：96T/48T 14215-86-2獐牙菜苷品牌 Sweroside 化线粒体氧化应激活性氧(ROS)鲁米诺化学发光法定量检测试剂盒50 20554-84-1小白菊内酯规格 Parthenolide RatIerleukin12,IL-12/P70ELISA试剂盒大鼠白介素12(IL-12/P70)ELISA试剂盒规格：96T/48T 60-82-2根皮素 Phloretin 小鼠抑制素βA(INHβA)ELISA试剂盒 ，英文名： INHβA ELISA Kit 102036-29-3原苏木素B说明书 Protosappanin B 内皮型合成酶3(eNOS-3)ELISA检测试剂盒RabbitEndothelialniicoxidesyhase3,eNOS-3ELISAKit 96T/48T 479-91-4蔓荆子黄素品牌 Vitexicarpin
100462-37-1络塞定规格 Rosiridin 英文名称RatCCL17ELISAKit大鼠CCL17规格：96T/48T 20554-84-1小白菊内酯规格 Parthenolide 英文名称RatCCL11ELISAKit大鼠CCL11规格：96T/48T 60-82-2根皮素 Phloretin 英文名称RatcatecholamineELISAKit大鼠儿茶酚胺(CA)规格：96T/48T 102036-29-3原苏木素B说明书 Protosappanin B 英文名称RatcatecholamineELISAKit大鼠儿茶酚胺(CA)规格：96T/48T 479-91-4蔓荆子黄素品牌 Vitexicarpin 英文名称Ratcardioophln-lELISAKit大鼠心肌营养素1(CT-1)规格：96T/48T
组蛋白H3-K122(mono)甲基化检测试剂盒10/20等 162857-78-5远志山酮III说明书 Polygalaxanthone III Mouseangiotensinogen,aGTELISA试剂盒小鼠血管紧张素原(aGT)ELISA试剂盒规格：96T/48T 142998-47-8丹酚酸D品牌 Salvianolic acid D 小鼠硬脂酰辅酶A去饱和酶(SCD)ELISA试剂盒 ，英文名： SCD ELISA Kit 115841-09-3丹酚酸C规格 Salvianolic acid C 巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA检测试剂盒RabbitMacrophageInflammatoryProtein-1α,MIP-1αELISAkit 96T/48T 三七皂苷R2(R型) R-Notoginsenoside R2 犬肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)试剂盒 Canine Creatine Kinase MB isoenzyme,CK-MB ELISA Kit 三七皂苷Ft1说明书 Notoginsenoside Ft1
PrimaCell™人胰腺癌组织源细胞试剂盒价格印乌碱规格 Indiaconitine 组织纤维素酶(cellulase)活性荧光定量检测试剂盒20 异连翘苷规格 Isoforsythiaside 组织纤维素酶(cellulase)活性比色法定量检测试剂盒20 异苦参酮 Isokurarinone 组织纤维二糖酶(cellobiase)活性比色法定量检测试剂盒20 异橙黄酮规格 3’,4’ ,5,7,8-pentamethoxyflavone 组织纤维蛋白溶酶原激活剂抑制物(PAI)活性化学发光法定量检测试剂盒20 氧代川南亭碱 组织西尼罗病毒蛋白酶(WVVPROTEASE)活性荧光淬灭法定量检测试剂盒20 |
