大鼠输尿管上皮细胞提取物培养

大鼠输尿管上皮细胞提取物【Rat Ureter: Normal Ureter Derivatives】

大鼠输尿管上皮细胞提取物是从大鼠原代输尿管上皮细胞提取的，大鼠原代输尿管上皮细胞从正常大鼠输尿管组织制备。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆，表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。

总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。
cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA第一链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证了产品的质量。
蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人关节软骨组织裂解液，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。

 实验要点及说明：

1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

操作要点：

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

鹅源性成分单重荧光PCR检测试剂盒（不含提取）483-Allylrhodanine145773-烯丙基罗丹宁

兔源性成分单重荧光PCR检测试剂盒（不含提取）48Nandrolone laurate2641月桂酸诺龙

貂源性成分单重荧光PCR检测试剂盒（不含提取）48Androst-eneβ,17β-diol 3,17-diacetate996雄甾-烯β,17β-二醇 3,17-二乙酸酯

牛羊源性成分通用单重荧光PCR检测试剂盒（不含提取）48Androstanolone heptanoate337768雄诺龙庚酸酯

狐狸源性成分单重荧光PCR检测试剂盒（不含提取）4811α-Hydroxyandrost-ene,17-dione564311α-羟基-雄甾-烯,17-二酮
Glycoursodeoxycholic acid  中文名：甘氨熊脱氧胆酸  分子式：C26H43NO5    猪骨钙素elisa试剂盒   猪骨钙素试剂盒   规格型号：96T/48T   猪骨钙素试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：猪骨钙素试剂盒、猪骨钙素eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

Glycodeoxycholic acid  中文名：甘氨脱氧胆酸  分子式：C26H43NO5    猪睾elisa试剂盒   猪睾试剂盒   规格型号：96T/48T   猪睾试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：猪睾试剂盒、猪睾eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  

Glyceryl hexacosanoate  中文名：  分子式：C29H58O4    猪基质金属蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISAKit  

Glycerol 1-(26-hydroxyhexacosanoate)  中文名：  分子式：C29H58O5    猪基质金属蛋白酶9(MMP-9)ELISAKit  

Glycerol  中文名：甘油  分子式：C3H8O3    猪睾(T)ELISAKit
酸枣仁皂苷B1(标准品)  Jujuboside B1  质量规格：HPLC≥98%，标准品 大鼠游离β绒毛膜促性腺激素(f-βCG)ELISA检测试剂盒Ratfreechorionicgonadoopin,f-βCGELISAKIT 96T/48T

薯蓣皂苷A  Prosapogenin A  质量规格：HPLC≥98%，标准品 大鼠游离β绒毛膜促性腺激素(f-βCG)试剂盒 Rat free chorionic gonadoopin,f-βCG ELISA KIT

Rocilinostat (ACY-1215)  ACY1215  质量规格：>98%,选择性组蛋白脱乙酰酶(HDAC6)抑制剂 大鼠游离雌三醇(FE3)试剂盒 Rat free Esiol,FE3 ELISA Kit

肉豆蔻酸,十四烷酸(标准品)  Myristic acid  质量规格：GC≥98%，标准品 大鼠游离睾酮(F-TESTO)ELISA检测试剂盒RatFreeTestoterone,F-TESTOELISAKit 96T/48T

肉豆蔻酸,十四烷酸  Myristic acid  质量规格：≥98%，BR 大鼠游离睾酮(F-TESTO)试剂盒 Rat Free Testosterone,F-TESTO ELISA Kit

丁二酮肟(镍试剂)  Dimethylglyoxime  质量规格：AR 大鼠游离甲状腺素(FT4)ELISA检测试剂盒RatFreeThyroxine,FT4ELISAKit 96T/48T

黄酮  Flavone  质量规格：>98%,进分 大鼠游离甲状腺素(FT4)试剂盒 Rat Free Thyroxine,FT4 ELISA Kit

依维菌素  Ivermectin  质量规格：>95%,BR 大鼠游离前列腺特异性抗原(fPSA)ELISA检测试剂盒RatFreeProstateSpecificAigen,fPSAELISAKit 96T/48T

细胞增殖示踪荧光探针(CFDA SE)  CFDA SE;Carboxyfluorescein diacetate, succinimidyl ester  质量规格：≥90%，用于荧光标记 大鼠游离前列腺特异性抗原(fPSA)试剂盒 Rat Free Prostate Specific Aigen,fPSA ELISA Kit

CAPE (咖啡酸苯乙酯)  CAPE (Caffeic Acid Phenethylester)  质量规格：>98%,BR 大鼠游离肉碱试剂盒 Rat Free Carnitine ELISA Kit
大鼠输尿管上皮细胞提取物培养乳酸脱氢酶（LDH）测试盒   Lactate dehydrogenase (LDH) test kit  3-Acetylcoumarin  中文名：3-乙酰基香豆素  分子式：C11H8O3  度：99.0%

乳酸（LD）测试盒（测血清、组织等）   Lactic acid (LD) test case (serum, tissue, etc.)  3a-Hydroxy-3,3a,7,7a-tetrahydrobenzofuran-2,6-dione  55604-88-1  中文名：  分子式：C8H8O4 

乳酸（LD）测试盒（测全血）   Lactic acid (LD) test case (whole blood)  3a-Hydroxy-3,3a,7,7a-tetrahydrobenzofuran-2,6-dione  55604-88-1  中文名：  分子式：C8H8O4  度：%  关键词：  植物提取物; 天然产物; 天然产物库

乳酸（LD）（血清、组织）检测   Lactic acid (LD) (whole blood) detection  3-Acetylcoumarin  3949-36-8  中文名：3-乙酰基香豆素  分子式：C11H8O3  度：99.0%  关键词： 

乳酸（LD）（全血）检测   Lactate dehydrogenase (LDH) detection  3-Acetylcoumarin  3949-36-8  中文名：3-乙酰基香豆素  分子式：C11H8O3

运输和保存：
视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满*培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。