小鼠肺大动脉内皮细胞提取物

小鼠肺大动脉内皮细胞提取物【Mouse Lung: Normal Artery Endothelial Cell Derivatives】

小鼠肺大动脉内皮细胞提取物是从小鼠肺大动脉内皮细胞提取的，小鼠肺大动脉内皮细胞从正常小鼠肺大动脉组织制备。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆，表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。

总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。
cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA第一链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证了产品的质量。
蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人关节软骨组织裂解液，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。

 实验要点及说明：

1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

操作要点：

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

偏肺病毒/腺病毒双重荧光PCR检测试剂盒48Manidipine dihydrochloride892265盐酸马尼地平

新双重荧光PCR检测试剂盒48Quetiapine1119749喹硫平

博卡（Boca）/呼吸道合胞（RSV）/偏肺（MPV）病毒三重荧光PCR检测试剂盒48Gemcitabine9581吉西他滨

冠状（Hcov）/副流感（PIV）/腺（ADV）病毒三重荧光PCR检测试剂盒48Mizolastine86125咪唑司汀

乙型流感病毒（IFVB-YA）分型单重荧光PCR检测试剂盒48Avanafil37847阿伐那非
Marsdenoside F  中文名：  分子式：C39H60O14  度：%  兔固（ALD）ELISA试剂盒  

8,14-Epoxyergosta-4,22-diene-3,6-dione  中文名：  分子式：C28H40O3  度：%  兔去甲上腺素(NA)ELISA试剂盒           

Schleicheol 1  中文名：  分子式：C30H52O2  度：%  兔去甲上腺素elisa试剂盒   兔去甲上腺素试剂盒   规格型号：96T/48T   兔去甲上腺素试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：兔去甲上腺素试剂盒、兔去甲上腺素elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

Uzarigenin digitaloside  中文名：  分子式：C30H46O8  度：97.5%  兔前列腺素F2aelisa试剂盒   兔前列腺素F2a试剂盒   规格型号：96T/48T   兔前列腺素F2a试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：兔前列腺素F2a试剂盒、兔前列腺素F2a elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

Daturametelin I  中文名：  分子式：C34H48O10  度：93.0%  兔前列腺素E2elisa试剂盒   兔前列腺素E2试剂盒   规格型号：96T/48T   兔前列腺素E2试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：兔前列腺素E2试剂盒、兔前列腺素E2 elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。
盐酸达克罗宁（标准品）  Dyclonine hydrochloride  质量规格：含量测定 小鼠内皮细胞TEK酪酸激酶(Tie2)ELISA试剂盒 ，英文名： Tie2 ELISA Kit

SGI-1027  SGI1027  质量规格：>98%,DNMT抑制剂 小鼠内皮型合成酶(eNOS)ELISA试剂盒 ，英文名： eNOS ELISA Kit

盐酸己新（标准品）  Bromhexine HCl  质量规格：含量测定 小鼠内皮型合成酶3(eNOS-3)ELISA检测试剂盒MouseEndothelialniicoxidesyhase3,eNOS-3ELISAKit 96T/48T

雷西莫特  R848,Resiquimod  质量规格：>98%,TLR7/TLR8激动剂 小鼠内皮型合成酶3(eNOS-3)ELISA试剂盒 ，英文名： eNOS-3 ELISA Kit

羟甲烟胺（标准品）  N-(Hydroxymethyl)nicotinamide  质量规格：含量测定 小鼠内皮型合酶(eNOS)ELISA试剂盒 ，英文名： eNOS ELISA Kit

对氨基水杨酸异（标准品）  Pasiniazid  质量规格：UV法溶出度检查 小鼠内皮型合酶(NOS3)ELISA试剂盒 ，英文名： NOS3 ELISA Kit

曲匹布通（标准品）  Trepibutone  质量规格：UV法含量测定 小鼠内皮型合酶3(eNOS-3)ELISA试剂盒 ，英文名： eNOS-3 ELISA Kit

曲匹地尔（标准品）  Trapidil  质量规格：供鉴别用 小鼠内皮抑素(ES)ELISA检测试剂盒MouseEndostatin,ESELISAKit 96T/48T

桂美酸（标准品）  CINAMETIC ACID  质量规格：溶出度检查 小鼠内皮抑素(ES)ELISA试剂盒 ，英文名： ES ELISA Kit

奥拉米特（标准品）  Orazamide  质量规格：UV法溶出度检查 小鼠内皮脂肪酶(EL)ELISA试剂盒 ，英文名： EL ELISA Kit
小鼠肺大动脉内皮细胞提取物大鼠叠氮胸苷(AZT)ELISAKit                 Tofacitinib   540737-29-9  中文名：枸橼酸托法替尼  分子式：C22H28N6O8 

大鼠第八因子相关抗原(FⅧAg)ELISAKit     Toltrazuril  中文名：托曲珠利  分子式：C18H14F3N3O4S 

大鼠雌激素受体(ER)ELISAKit                 Tiotropium bromide  136310-93-5  中文名：噻托溴铵  分子式：C19H22NO4S2 

大鼠补体片断5a(C5a)ELISAKit                 Tokinolide B  112966-16-2  中文名：  分子式：C24H28O4 

大鼠补体蛋白3(C3)ELISAKit     Tofacitinib   540737-29-9  中文名：枸橼酸托法替尼  分子式：C22H28N6O8  度：98.0%

 运输和保存：
视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满*培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。