人体视网膜组织提取物

人体视网膜组织提取物【Eye: Normal Human Retinal Derivatives】

视网膜居于眼球壁的内层，是一层透明的薄膜。视网膜由色素上皮层和视网膜感觉层组成，两层间在病理情况下可分开，称为视网膜脱离。色素上皮层与脉络膜紧密相连，由色素上皮细胞组成，它们具有支持和营养光感受器细胞、遮光、散热以及再生和修复等作用。公司科技提供来自新鲜或冷冻人体视网膜组织中高质量的总RNA，PCR准备的第一条cDNA链，蛋白质及其亚组分。这些临床定义的正常人体组织标本采集自各地方医院，采集工作根据IRB和

总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。
cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA第一链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证了产品的质量。
蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人关节软骨组织裂解液，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。

实验要点及说明；

1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

操作要点；

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

Redzol（一步法总RNA提取试剂）1mln-Tritriacontan6,18-dione245146

RNasin（RNA酶抑制剂）1,000UBi-linderone12273759

M-MLV反转录酶,000Uvibo-Quercitol4886

Fasta-II快速定点突变试剂盒15 rxnSuccinic acid15

Muta-direct™定点突变试剂盒15 rxn6-Deoxy-O-methyl-β-allopyranosyl(1→4)-β-cymaronic acid δ-lactone191313
Duloxetine hydrochloride  136434-34-9  中文名：盐酸度洛西汀  分子式：C18H20ClNOS    土壤无机0（S-PHOS）含量测试盒   可见分光光度法   50管/24样

Ritonavir  155213-67-5  中文名：利托那韦  分子式：C37H48N6O5S2    土壤脱氢酶(SDHA)测试盒   可见分光光度法   50管/24样           

3-O-Acetylandrostenone hydrazone  122914-94-7  中文名：3-O-乙酰基雄酮腙  分子式：C21H32N2O2    土壤纤维素酶（S-CL）试剂盒   可见分光光度法    50管/24样

Androstenone hydrazone  63015-10-1  中文名：雄酮腙  分子式：C19H30N2O    土壤酸性0酸酶（S-ACP）试剂盒   可见分光光度法   50管/48样

3,3-Dimethoxy-5α-androstan-17-one  3591-19-3  中文名：3,3-二甲氧基-5α-雄烷-17-酮  分子式：C21H34O3    土壤中性0酸酶（S-NP）试剂盒   可见分光光度法   50管/48样
去氧穿心莲内酯 HPLC≥98% 5mg Helly固着液50毫升

去氧胆酸 HPLC≥98% 20mg HeneggImmunoglobulinofYolk,IgYELISA试剂盒鸡卵黄球蛋白(IgY)ELISA试剂盒规格：96T/48T

脱氧胆酸钠（牛） HPLC≥98% 20mg HepatitisBvirusRFLP基因分析试剂盒20

去氧紫草素 HPLC≥98% 20mg Hexamer(随机引物)(200纳克/微升)100微升

去乙酰车叶草苷酸 HPLC≥98% 20mg HHV6(HUMANHERPESVIRUS6)病毒标准曲线定量PCR扩增检测试剂盒2

去乙酰华蟾毒精 HPLC≥95% 10mg HHV6-A(HUMANHERPESVIRUS6-A)病毒标准曲线定量PCR扩增检测试剂盒2

去乙酰基Ophiopojaponin A  5mg HHV6-B(HUMANHERPESVIRUS6-B)病毒标准曲线定量PCR扩增检测试剂盒2

染料木苷 HPLC≥98% 20mg HHV病毒DNA化试剂盒20

染料木素 HPLC≥98% 20mg HIS(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微升

人参二醇 HPLC≥98% 20mg HISTONEH3蛋白表达ELISA定量检测试剂盒25
人体视网膜组织提取物兔血清总补体(CH50)ELISAKit     Adrenosterone  382-45-6  中文名：肾上腺甾酮  分子式：C19H24O3 

兔血清淀粉样蛋白Aelisa试剂盒   兔血清淀粉样蛋白A试剂盒   规格型号：96T/48T   兔血清淀粉样蛋白A试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：兔血清淀粉样蛋白A试剂盒、兔血清淀粉样蛋白A elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。     7-Acetoxy-4-methylcoumarin  中文名：7-乙酰氧基-4-甲基香豆素  分子式：C12H10O4 

兔血清淀粉样蛋白A(SAA)ELISAKit     5,6-Dimethyl-2-Benzothiazolamine  29927-08-0  中文名：5,6-二甲基-2-苯并噻唑胺  分子式：C9H10N2S 

兔血清(NO)ELISA试剂盒     5'-Deoxy-5-fluorocytidine  中文名：  分子式：C9H12FN3O4  度：99.0%

兔血凝素样氧化低密度脂蛋白受体1   英文名称：   Rabbit Lctin like oxLDL Receptor 1   规格：   48T/96T   英文缩写：   LOX-1  5'-Deoxy-5-fluorocytidine  66335-38-4  中文名：  分子式：C9H12FN3O4  度：99.0%

运输和保存；
视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满*培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。