大鼠淋巴内皮细胞提取物说明书

大鼠淋巴内皮细胞提取物【Rat Lymph: Normal Endothelial Cells Derivatives】

大鼠淋巴内皮细胞提取物是从大鼠原代淋巴内皮细胞提取的，大鼠原代淋巴内皮细胞从正常大鼠淋巴组织制备。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆，表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。

总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。
cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA第一链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证了产品的质量。
蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人关节软骨组织裂解液，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。

 实验要点及说明：

1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

操作要点：

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

高分子量非变性电泳蛋白质Marker（6669 kD）   次 5-Benzimidazolecarboxylic acid1578865-苯并咪唑甲酸

碱性蛋白非变性电泳蛋白Marker   次 5-Azacytidine375-氮胞苷

宽分子量蛋白Marker（00KD）   次 5-Androstenβ-ol7-one ethyleneketal774

三色预染宽分子量蛋白质Marker（kD）   次/0元/2×次/0元/×次 5-Aminouracil93225-氨基尿嘧啶

双色预染宽分子量蛋白Marker（KD）   次 5-Aminosalicylic acid8975-氨基水杨酸
Human fibronection related aigen (FRA) ELISA Kit 人纤维连接素相关抗原(FRA)ELISA试剂盒  17β-Benzoyloxy-androsta-1,4-dien-3-one  19041-66-8  中文名：17β-苯甲酰氧基-雄甾-1,4-二烯-3-酮  分子式：C26H30O3 

Human fibronectin (FN) ELISA Kit 人纤连蛋白(FN)ELISA试剂盒  1-O-Methylnataloe-emodin  中文名：  分子式：C16H12O5 

Human fibromodulin (fibromodulin) ELISA Kit 人纤调蛋白(fibromodulin)ELISA试剂盒  2-(2,2-Dimethyl-1,3-dioxolan-4-yl)propane-1,2-diol  129141-48-6  中文名：  分子式：C8H16O4 

Human fibromodulin (fgl2) ELISA Kit 人纤维介素蛋白(fgl2)ELISA试剂盒  1'-Acetonaphthone  中文名：1'-萘乙酮  分子式：C12H10O 

Human fibroblast surface aigen (FSP) ELISA Kit 人纤维母细胞表面抗原(FSP)ELISA试剂盒  17α-Neriifolin  中文名：  分子式：C30H46O8
替米沙坦酰基-β-D-葡萄糖苷酸  Telmisartan Acyl-β-D-glucuronide  质量规格：美国进口 英文名称RatinhibinBELISAKit大鼠抑制素B(INHB)ELISA试剂盒规格：96T/48T

异-d4  Isoniazid-d4  质量规格：美国进口 英文名称RatinhibinBELISAKit大鼠抑制素B(INHB)ELISA试剂盒规格：96T/48T

噻托铵-d3  Tiotropium-d3 Bromide  质量规格：美国进口 英文名称RatInsulieceptorβ(ISR-β)ELISAKIT大鼠胰岛素受体β(ISR-β)规格：96T/48T

去乙基盐酸胺酮-d4  Desethyl Amiodarone-d4 Hydrochloride  质量规格：美国进口 英文名称RatInsulieceptorβ(ISR-β)ELISAKIT大鼠胰岛素受体β(ISR-β)规格：96T/48T

去乙基盐酸胺酮  Desethyl Amiodarone Hydrochloride  质量规格：美国进口 英文名称RatInsulinELISAKit大鼠胰岛素(Insulin)ELISAKit规格：96T/48T

二-N-去乙基胺酮  Di-N-desethyl Amiodarone  质量规格：美国进口 英文名称RatInsulinELISAKit大鼠胰岛素(Insulin)ELISAKit规格：96T/48T

N-去甲基阿莫曲普坦  N-Desmethyl Almotriptan  质量规格：美国进口 英文名称RatLaminaPropriaLymphocyteELISAKit大鼠脂蛋白脂酶(LPL)规格：96T/48T

阿莫曲普坦代谢产物M2  Almotriptan Metabolite M2  质量规格：美国进口 英文名称RatLaminaPropriaLymphocyteELISAKit大鼠脂蛋白脂酶(LPL)规格：96T/48T

阿莫曲普坦-d6  Almotriptan-d6  质量规格：美国进口 英文名称RatLBPELISAKit大鼠脂多糖结合蛋白(LBP)规格：96T/48T

阿莫曲普坦盐酸盐  Almotriptan Hydrochloride  质量规格：美国进口 英文名称RatLDL-ICELISAKit大鼠低密度脂蛋白复合物(LDL-IC)规格：96T/48T
大鼠淋巴内皮细胞提取物说明书人转化生长因子β2(TGF-β2)酶联吸附测定试剂盒   Human TGF-β2 (ansforming Growth Factor β2) ELISA Kit  2-Naphthyl N-benzoylphenylalaninate  15873-25-3  中文名：2-萘基N-苯甲酰基苯丙氨酸酯  分子式：C26H21NO3  度：98.0%   

人转化生长因子β2(TGFβ2)ELISA试剂盒              3-(3-Chloropropyl)-1,3-dihydro-7,8-dimethoxy-2H-3-benzazepin-2-one  中文名：  分子式：C15H18ClNO3 

人转化生长因子β1elisa试剂盒   人转化生长因子β1试剂盒   规格型号：96T/48T   人转化生长因子β1试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：人转化生长因子β1试剂盒、人转化生长因子β1 elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  2-Naphthyl N-benzoylphenylalaninate  中文名：2-萘基N-苯甲酰基苯丙氨酸酯  分子式：C26H21NO3  度：98.0%

人转化生长因子αelisa试剂盒   人转化生长因子α试剂盒   规格型号：96T/48T   人转化生长因子α试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：人转化生长因子α试剂盒、人转化生长因子α elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。     2-Naphthyl N-benzoylphenylalaninate  中文名：2-萘基N-苯甲酰基苯丙氨酸酯  分子式：C26H21NO3 

人转化生长因子α(TGF-α)ELISA试剂盒     2-Methylsulfanylpyrimidin-4(3H)-one  5751-20-2  中文名：  分子式：C5H6N2OS  度：98.0%  关键词：

运输和保存：
视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满*培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。