人体表皮组织提取物【Skin: Normal Human Epidermis Derivatives】 人表皮主要由三种细胞构成,除角质形成细胞外,还包括黑素细胞和郎格汉斯细胞。此外,在某些部位还存在默克尔细胞。公司科技提供来自新鲜或冷冻人体表皮组织中高质量的总RNA,PCR准备的第一条cDNA链,蛋白质及其亚组分。这些临床定义的正常人体组织标本采集自各地方医院,采集工作根据IRB和HIPAA批准的方案进行。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆,表达图谱 总RNA制备:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。 cDNA制备:纯化后的总RNA来合成cDNA第一链,以50ul总反应体系进行逆转录,体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA,1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析,保证了产品的质量。 蛋白制备:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人关节软骨组织裂解液,离心去除组织碎片,通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度,组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF,-80度保存。 产品名称 | 人体表皮组织提取物培养 | 英文名称 | Skin: Normal Human Epidermis Derivatives | 货号 | EYX99341 |
实验要点及说明; 1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法; 2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理; 3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻; 4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率; 5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。 运输和保存; 视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。 1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。 2)T-25培养瓶充满*培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
操作要点; 1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。 2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内*解冻,使细胞能尽快通过易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。 3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。 4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。 5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。 6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。 RIPA裂解液(强)0 ml2-Hydroxytetracosanoic acid ethyl ester1241117 RNaseA溶液×1ml 2-Hydroxyquinoxaline11967 RNase-free水/DEPC水0ml /0ml2-Hydroxy-methylanthraquinone1724 Spectinomycin solution 壮观霉素溶液5×1ml2-Flurbiprofen5154氟比洛芬 Streptomycin solution 链霉素溶液5×1ml2-Fluoroadenosine1468 Echinoynethiophene A 中文名: 分子式:C13H10O2S 猪C反应蛋白(CRP)ELISAKit Ecdysterone 20,22-monoacetonide 中文名: 分子式:C30H48O7 猪可溶性细胞间粘附分子1(sICAM-1)ELISAKit Dyphylline 中文名:二羟丙茶碱 分子式:C10H14N4O4 猪热休克蛋白40elisa试剂盒 猪热休克蛋白40试剂盒 规格型号:96T/48T 猪热休克蛋白40试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:猪热休克蛋白40试剂盒、猪热休克蛋白40eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。 Duloxetine hydrochloride 中文名:盐酸度洛西汀 分子式:C18H20ClNOS 猪热休克蛋白20elisa试剂盒 猪热休克蛋白20试剂盒 规格型号:96T/48T 猪热休克蛋白20试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:猪热休克蛋白20试剂盒、猪热休克蛋白20eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。 D-Tryptophan methyl ester hydrochloride 中文名: 分子式:C12H15ClN2O2 猪去甲上腺素elisa试剂盒 猪去甲上腺素试剂盒 规格型号:96T/48T 猪去甲上腺素试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:猪去甲上腺素试剂盒、猪去甲上腺素eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。 去氧孕烯 Desogestrel 质量规格:>98% 沉淀法去内试剂盒20 地索奈德 Desonide 质量规格:>98.5% 陈旧血红细胞溶解液500毫升 甲磺酸加贝酯 Gabexate mesylate 质量规格:>98.5%,BR 成分比色法定量检测试剂盒20 甲磺酸加贝酯(标准品) Gabexate mesylate 质量规格:HPLC>98%,标准品 持久型ECL化学发光显影试剂盒10 地塞米松,氟美松 Dexamethasone 质量规格:>99%,BR,可用于细胞培养 持久型ECL印迹化学发光溶液A液:100毫升B液:500微升1000cm2 地塞米松,氟美松(标准品) Dexamethasone 质量规格:HPLC>98%,标准品 虫卵细胞活力和死亡体外裂卵(invioexcystation)定量检测试剂盒20 盐酸地尔硫卓 Diltiazem HCL 质量规格:>98%,BR 虫卵细胞活力和死亡细胞流式定量检测试剂盒20 盐酸地尔硫卓(标准品) Diltiazem HCL 质量规格:含量测定,标准品 虫卵细胞活力和死亡荧光定量检测试剂盒50 地美司钠 Dimesna 质量规格:美国进口 初级离心柱DNA回收试剂盒20 甲磺酸多拉司琼 Dolasetron mesylate 质量规格:>98.5%,BR 创伤弧菌(Vibriovulnificus)鉴定16SrDNAPCR扩增检测试剂盒20 人体表皮组织提取物培养兔心肌特异性肌钙蛋白T(c)ELISAKit 5-Aminouracil 932-52-5 中文名:5-氨基尿嘧啶 分子式:C4H5N3O2 兔心肌肌钙蛋白Ⅰelisa试剂盒 兔心肌肌钙蛋白Ⅰ试剂盒 规格型号:96T/48T 兔心肌肌钙蛋白Ⅰ试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:兔心肌肌钙蛋白Ⅰ试剂盒、兔心肌肌钙蛋白Ⅰ elisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。 5-Benzyl-1H-tetrazole 18489-25-3 中文名:5-苄基-1H-四唑 分子式:C8H8N4O 度:98.0% 兔心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISAKit 4-Hydroxy-4-(methoxycarbonylmethyl)cyclohexanone 中文名: 分子式:C9H14O4 兔心肌钙蛋白T(rabbit c) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装 5-(1-Piperazinyl)benzofuran-2-carboxamide 中文名: 分子式:C13H15N3O2 度:98.0% 兔心肌钙蛋白I(rabbit cTnI) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装 5-(2-Aminopropyl)-7-cyanoindolin-1-yl)propyl benzoate 239463-72-0 中文名: 分子式:C22H25N3O2 |