大鼠主动脉平滑肌细胞提取物培养

大鼠主动脉平滑肌细胞提取物【Rat Aorta: Normal Aortic Smooth Muscle Cell Derivatives】

大鼠主动脉平滑肌细胞提取物是从大鼠主动脉平滑肌细胞提取的，大鼠主动脉平滑肌细胞从正常大鼠主动脉组织制备。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆，表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。

总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。
cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA第一链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证了产品的质量。
蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人关节软骨组织裂解液，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。

 实验要点及说明：

1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

操作要点：

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

含提取）2-Acetamido-deoxy-D-glucose75127N-乙酰氨基葡萄糖

狐狸源性成分单重荧光PCR检测试剂盒（定量）（不含提482-Amino-chloro,4-naphthoquinone279712-氨基-氯,4-萘醌

取）2-Amino-chlorobenzothiazole9542-氨基-氯苯并噻唑

DNA 提取试剂盒（过柱法-荧光配套）（专门配套亿森宝48Solvent Yellow 3976溶剂黄

荧光PCR 检测试剂盒用于微生物及动物组织样本的DNA3-Acetylcoumarin394963-乙酰基香豆素
Human ubiquitin ligase (E3/UBPL) ELISA Kit 人泛素连接酶(E3/UBPL)ELISA试剂盒  2-Amino-3-hydroxyanthraquinone  中文名：2-氨基-3-羟基蒽醌  分子式：C14H9NO3 

Human ubiquitin decomposition enzyme (DUB) ELISA Kit 人泛素分解酶(DUB)ELISA试剂盒  2-Amino-6-chloropurine  10310-21-1  中文名：2-氨基-6-氯嘌呤  分子式：C5H4ClN5 

Human ubiquitin conjugating enzyme (E2/UBCE) ELISA Kit 人泛素结合酶(E2/UBCE)ELISA试剂盒  2-Amino-4'-fluorobenzophenone  中文名：  分子式：C13H10FNO 

Human ubiquitin activating enzyme (E1/UBAE) ELISA Kit 人泛素激活酶(E1/UBAE)ELISA试剂盒  2-Amino-5-nitrobenzophenone  1775-95-7  中文名：2-氨基-5-硝基二苯甲酮  分子式：C13H10N2O3 

Human thymus peptide five (TP-5) ELISA Kit 人胸腺五肽(TP-5)ELISA试剂盒  (1R,2S)-1-Amino-2-indanol  中文名：(1R,2S)-1-氨基-2-茚醇  分子式：C9H11NO
头孢呋辛钠(标准品)  Cefuroxime    质量规格：效价测定 白三烯C4(LTC4)ELISA检测试剂盒MonkeyLeukoieneC4,LT-C4ELISAKit 96T/48T

头孢曲松钠  Ceftriaxone    质量规格：potency>980ug/mg,BR 包虫抗体IgG(间接法二步法)

头孢曲松钠（标准品）  Ceftriaxone    质量规格：HPLC>98%,标准品 薄层色谱分析20样本

头孢他啶(含碳酸钠)  Ceftazidime with  Carbonate   质量规格：94.0-105.0%,USP,BR 冰冻切片中性脂质苏丹黑染色试剂盒50

头孢唑啉钠  Cefazolin   质量规格：>95%,BR 冰冻切片中性脂质油红O染色试剂盒50

头孢唑啉钠（标准品）  Cefazolin   质量规格：HPLC>95%,标准品 冰冻切片总胆(酯酶法)菲律宾(FILIPIN)荧光染色试剂盒20

哌拉西林钠  Piperacillin    质量规格：>900μg//mg,USP,BR 冰冻切片总胆高氯酸萘醌(PAN)染色试剂盒50

哌拉西林钠(标准品)  Piperacillin    质量规格：含量测定 冰冻切片总胆舒尔茨染色试剂盒50

环吡司胺; 环吡酮胺  Ciclopirox Olamine  质量规格：>99%,USP32,BR,可用于细胞培养 冰冻切片总游离胆菲律宾(FILIPIN)荧光染色试剂盒50

环吡司胺; 环吡酮胺（标准品）  Ciclopirox Olamine  质量规格：HPLC>98%,标准品 冰冻切片总脂酶活性格莫瑞(Gomori)染色试剂盒50
大鼠主动脉平滑肌细胞提取物培养人中性粒细胞防御素1-3(HNP1-3)酶联吸附测定试剂盒   Human HNP1-3 (Neuophil Peptide 1-3) ELISA Kit  2-Cyclopropyl-3-[(diphenylphosphinyl)methyl]-4-(4-fluorophenyl)quinoline  146578-99-6  中文名：  分子式：C31H25FNOP  度：98.0%  关键词： 

人中性粒细胞防御素1-3(HNP1-3)ELISAKit     2-Cyano-N-[4-(Trifluoromethyl)Phenyl]Acetamide  24522-30-3  中文名：  分子式：C10H7F3N2O  度：98.0%  关键词： 

人中性粒细胞弹性蛋白酶elisa试剂盒   人中性粒细胞弹性蛋白酶试剂盒   规格型号：96T/48T   人中性粒细胞弹性蛋白酶试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：人中性粒细胞弹性蛋白酶试剂盒、人中性粒细胞弹性蛋白酶elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。     2-Cyclopropyl-3-[(diphenylphosphinyl)methyl]-4-(4-fluorophenyl)quinoline  中文名：  分子式：C31H25FNOP 

人中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)ELISA试剂盒     2-C-Methyl-D-erythro,4-lactone  18465-71-9  中文名：  分子式：C5H8O4  度：98.0%  关键词：  臭常山; 绛三叶; 深红三叶草; 菜豆; 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库

人中心体蛋白110(CEP110)酶联吸附测定试剂盒   Human CEP110 (Cenosomal Protein 110kDa) ELISA Kit  2-Aminoisonicotinic acid  13362-28-2  中文名：2-氨基异烟酸  分子式：C6H6N2O2

运输和保存：
视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满*培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。