人食管癌组织源成纤维细胞提取物【Human Cancer: Esophageal Cancer Fibroblast Derivatives】 人食管癌组织源成纤维细胞提取物是从人食管癌组织源成纤维细胞提取的,人食管癌组织源成纤维细胞从人食管癌组织制备。人食管癌组织采集自各地方医院,采集工作根据IRB 和 HIPAA批准的方案进行。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆,表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。 总RNA制备:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。 cDNA制备:纯化后的总RNA来合成cDNA第一链,以50ul总反应体系进行逆转录,体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA,1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析,保证了产品的质量。 蛋白制备:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人关节软骨组织裂解液,离心去除组织碎片,通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度,组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF,-80度保存。 产品名称 | 人食管癌组织源成纤维细胞提取物价格 | 英文名称 | Human Cancer: Esophageal Cancer Fibroblast Derivatives | 货号 | EYX99112 |
实验要点及说明: 1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法; 2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理; 3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻; 4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率; 5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。 运输和保存: 视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。 1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。 2)T-25培养瓶充满*培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
操作要点: 1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。 2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内*解冻,使细胞能尽快通过易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。 3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。 4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。 5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。 6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。 犬狂犬抗体ELISA检测试剂盒192Methyl 3-amino-[[(2'-cyanobiphenyl-yl)methyl]amino]benzoate13648 羊(sheep)羊痘病毒抗体(Capripox-Ab)ELISA检测试剂盒19211β-Hydroxy'-methyl'βH-pregna,4-die7,16-d]oxazole,-dione136498 口蹄疫O型抗体ELISA检测试剂盒(牛羊猪通用,阻断法)192Deflazacort144847地夫可特 肺炎支原体单重荧光PCR检测试剂盒48Cortisone acetate19/4/4醋酸可的松 铜绿假单胞菌单重荧光PCR检测试剂盒48Hydroxyprogesterone686羟孕酮 Methyl 2-(((2'-cyano-[1,1'-biphenyl]-4-yl)methyl)amino)-3-nitrobenzoate 中文名: 分子式:C22H17N3O4 度:98.0% 小鼠肺表面活性物质相关蛋白A 英文名称: Mouse Pulmonary surfacta associated protein type A 规格: 48T/96T 英文缩写: SP-A Ethyl2-((tert-butoxycarbonyl)amino)-3-nitrobenzoate 中文名: 分子式:C14H18N2O6 度:98.0% 小鼠肺表面活性物质相关蛋白D 英文名称: Mouse Pulmonary surfacta associated protein type D 规格: 48T/96T 英文缩写: SP-D Trenbolone cyclohexylmethylcarbonate 中文名:群勃龙环己甲基碳酸酯 分子式:C26H34O4 度:98.0% 小鼠S100钙结合蛋白A7 英文名称: Mouse S100 Calcium Binding Protein A7 规格: 48T/96T 英文缩写: S100A7 Ceftiofur hydrochloride 中文名:头孢噻呋盐酸盐 分子式:C19H18ClN5O7S3 度:98.0% 小鼠N-乙酰基-丝酰-天门冬酰-赖酰-脯酸(AcSDKP)ELISA试剂盒 Cefquinome 中文名:头孢喹咪 分子式:C23H24N6O5S2 度:98.0% 小鼠N-乙酰-β-D-基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA试剂盒 米帕明/丙咪嗪(标准品) Clomipramine HCL 质量规格:HPLC>98%,标准品 超氧化物歧化酶(SOD)酵母/真菌裂解样品制备试剂盒50 硫酸氢氯吡格雷 I型 Clopidogrel Bisulfate 质量规格:>98%,I型 超氧化物歧化酶(SOD)细胞裂解样品制备试剂盒50 硫酸氢氯吡格雷 II型(标准品) Clopidogrel Bisulfate 质量规格:>98%,标准品 超氧化物歧化酶(SOD)细胞裂解样品制备试剂盒50 硫酸氢氯吡格雷 II型 Clopidogrel Bisulfate 质量规格:含量97.0%-101.5%,II型 超氧化物歧化酶(SOD)细菌裂解样品制备试剂盒50 萘丁美酮/萘普酮 Nabumetone 质量规格:>99% 超氧化物歧化酶(SOD)植物裂解样品制备试剂盒50 萘丁美酮/萘普酮(标准品) Nabumetone 质量规格:HPLC>98%,标准品 超氧化物歧化酶(SOD)植物裂解样品制备试剂盒50 地瑞拉韦 Darunavir 质量规格:>98% 超氧化物歧化酶(SOD)组织裂解样品制备试剂盒50 沃氏物 Methoxydienone 质量规格:含量≥85% 超氧化物歧化酶(SOD)组织裂解样品制备试剂盒50 DL-α-羟基戊二酸二钠 DL-α-Hydroxyglutaric acid di salt 质量规格:98%,GC,进分sigma 94577 超氧阴离子清除剂TEMPOL溶液1毫升/500毫摩尔 地美胺 Demecarium Bromide 质量规格:>99%,BR 沉淀法去内试剂盒20 人食管癌组织源成纤维细胞提取物价格β-Sitosterol 中文名:β-谷甾醇 分子式:C29H50O 应急反应生长因子-1 英文名称: Early growth response 1 规格: 48T/96T 英文缩写: EGR-1 β-Anhydrouzarigenin 中文名: 分子式:C23H32O3 转录因子E2F1 英文名称: anscription factor E2F1 规格: 48T/96T 英文缩写: E2F1 α-Tocopherolquinone 中文名: 分子式:C29H50O3 腺来源的内皮生长因子 英文名称: endocrine gland-derived vascular endothelial growth factor 规格: 48T/96T 英文缩写: EG-VEGF α-Spinasterone 中文名: 分子式:C29H46O 中性粒细胞蛋白酶抑制剂Elafin 英文名称: neuophil elastase inhibitor Elafin 规格: 48T/96T 英文缩写: Elafin α-Spinasterol glucoside 中文名:α-菠甾醇葡萄糖苷 分子式:C35H58O6 游离脂肪酸(NEFA)检测 Total iron binding (TIBC) detection |