人胰腺癌组织源细胞提取物说明书

人胰腺癌组织源细胞提取物【Human Cancer: Pancreatic Cancer Tissue Cell Derivatives】

人胰腺癌组织源细胞提取物是从人胰腺癌组织源细胞提取的，人胰腺癌组织源细胞从人胰腺癌组织制备。人胰腺癌组织采集自各地方医院，采集工作根据IRB 和 HIPAA批准的方案进行。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆，表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。

总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。
cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA第一链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证了产品的质量。
蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人关节软骨组织裂解液，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。

 实验要点及说明：

1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

操作要点：

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

曲拉通 X00 Triton X000ml6-O-Feruloylglucose13788756-O-阿魏酰葡萄糖

四甲基 TEMEDmlArillatose B1379415

蔗糖 Sucrose0gCatalponol methylthiomethyl ether143574

十二烷基硫酸钠 SDS0gEthyl glucoside31989乙基葡萄糖苷

异丙基-ß-D-硫代半乳糖苷 IPTG5g3-Hydroxycatalponol2656444
Methyl (9Z,11E)-13-hydroxyoctadeca-9,11-dienoate  109837-85-6  中文名：  分子式：C19H34O3  度：%  关键词：    小鼠晚期糖基化终末产物elisa试剂盒   小鼠晚期糖基化终末产物试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠晚期糖基化终末产物试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠晚期糖基化终末产物试剂盒、小鼠晚期糖基化终末产物eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

Methyl (3R)-3-(tert-butyldimethylsilyloxy)-5-oxo-6-triphenylphosphoranylidenehexanoate  147118-35-2  中文名：  分子式：C31H39O4PSi  度：98.0%  关键词：    小鼠少突胶质细胞髓鞘糖蛋白抗体elisa试剂盒   小鼠少突胶质细胞髓鞘糖蛋白抗体试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠少突胶质细胞髓鞘糖蛋白抗体试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠少突胶质细胞髓鞘糖蛋白抗体试剂盒、小鼠少突胶质细胞髓鞘糖蛋白抗体eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

Methoxydienone  2322-77-2  中文名：沃氏物  分子式：C20H28O2  度：98.0%  关键词：    小鼠胰蛋白酶elisa试剂盒   小鼠胰蛋白酶试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠胰蛋白酶试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠胰蛋白酶试剂盒、小鼠胰蛋白酶eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

Methenolone enanthate  303-42-4  中文名：美替诺龙庚酸酯  分子式：C27H42O3  度：98.0%  关键词：    小鼠支原体elisa试剂盒   小鼠支原体试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠支原体试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠支原体试剂盒、小鼠支原体eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  

Methenolone acetate  434-05-9  中文名：美替诺龙醋酸酯  分子式：C22H32O3  度：98.0%  关键词：    小鼠晚期糖基化终末产物(AGEs)ELISA试剂盒
盐酸罗匹尼罗  Ropinirole HCl  质量规格：>98.0% 大鼠0酸化蛋白激酶B(P-PKB)试剂盒 Rat phosphorylated protein kinase B,p-PKB ELISA Kit

盐酸罗哌卡因  Ropivacaine hydrochloride   质量规格：>99%,BR,一水合物 大鼠0酸化蛋白激酶C(P-PKC)ELISA检测试剂盒RatphosphoProteinKinaseC,P-PKCELISAKit 96T/48T

盐酸罗哌卡因(标准品)  Ropivacaine hydrochloride   质量规格：>99%,标准品 大鼠0酸化蛋白激酶C(P-PKC)试剂盒 Rat phospho Protein Kinase C,P-PKC ELISA Kit

瑞舒伐他汀钙/罗苏伐他汀钙  Rosuvastatin Calcium  质量规格：>99%,BR 大鼠0酸化缝隙连接蛋白α1,43kDa(phosphorylated GJA1)试剂盒 Rat phosphorylated gap junction protein, alpha 1,43kDa(phosphorylated GJA1)ELISA kit

瑞舒伐他汀钙/罗苏伐他汀钙（标准品）  Rosuvastatin Calcium  质量规格：HPLC>98%,标准品 大鼠0酸化核因子-κB(p-NF-κB)试剂盒 Rat phosphor-nuclear factor kappa B,p-NF-κB ELISA Kit

西他列汀一水  Sitagliptin phosphate monohydrate  质量规格：≥98.5%,BR,可用于细胞培养 大鼠0酸化糖原合成酶激酶3(pGSK-3)试剂盒 Rat phospho glycogen syhase kinase 3,pGSK-3 ELISA Kit

西他列汀一水（标准品）  Sitagliptin phosphate monohydrate  质量规格：HPLC>98%,标准品 大鼠0酸化细胞外信号调节激酶(pERK)试剂盒 Rat phospho-exacellular signal-regulated kinase,pERK ELISA Kit

壮观霉素,盐酸大观霉素  Spectinomycin Hydrochloride   质量规格：>95%,BR 大鼠0酸化腺苷酸活化蛋白激酶(pAMPK)试剂盒 Rat Phosphorylated adenosine monophosphate activated protein kinase,pAMPK ELISA kit

壮观霉素(标准品)  Spectinomycin Hydrochloride   质量规格：含量测定 大鼠0酸化胰岛素受体(pISR1)试剂盒 Rat phosphorylated insulin receptor subsate 1,pISR1 ELISA kit

盐酸坦洛新/盐酸坦索罗辛  Tamsulosin hydrochloride   质量规格：>98.5%,EP6.5  大鼠0酸化乙酰辅酶A羧化酶(pACCase)试剂盒 Rat Phosphorylated acetyl-CoA catboxylase,pACCase ELISA Kit
人胰腺癌组织源细胞提取物说明书λ噬菌体基因组DNA快速提取试剂盒   Fast exaction kit for phage genomic DNA  Panaxyne  122855-49-6  中文名：  分子式：C14H20O2  度：97.0%  关键词：  细胞毒活性; 聚乙炔; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库

γ-谷酰转肽酶活性elisa试剂盒   γ-谷酰转肽酶活性试剂盒   规格型号：96T/48T   γ-谷酰转肽酶活性试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：γ-谷酰转肽酶活性试剂盒、γ-谷酰转肽酶活性elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  Tryptophan  中文名：  分子式：C11H12N2O2 

γ-谷酰半胱酸合成酶（γ-GCS）测定试剂盒（速率法）  Withaperuvin C  中文名：  分子式：C28H38O7 

γ干扰素   英文名称：   Rabbit γ Ierferon   规格：   48T/96T   英文缩写：   IFN-γ  Albendazole  中文名：阿苯达唑  分子式：C12H15N3O2S 

β-整合素   英文名称：   β-Iegrin   规格：   48T/96T   英文缩写：   β-Iegrin  Wallicoside  88797-59-5  中文名：断节参苷  分子式：C61H98O26  度：98.0%  关键词：

 运输和保存：
视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满*培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。