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人脐动脉组织提取物培养

人脐动脉组织提取物培养
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人脐动脉组织提取物培养在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
  人脐动脉组织提取物培养的详细资料:

产品名称

人脐动脉组织提取物培养

英文名称

Aortic: Normal Human Aortic Derivatives

货号

EYX99333

人脐动脉组织提取物【Aortic: Normal Human Aortic Derivatives

在哺乳动物胚胎发育过程中,从胎儿心脏发出,将胎儿体内代谢废物和代谢产生的二氧化碳运送至胎盘,转移至母体的动脉,其内为静脉血。公司科技提供来自新鲜或冷冻人脐动脉组织中高质量的总RNAPCR准备的第一条cDNA链,蛋白质及其亚组分。这些临床定义的正常人体组织标本采集自各地方医院,采集工作根据IRBHIPAA批准的方案进行。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因

总RNA制备:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。
cDNA制备:纯化后的总RNA来合成cDNA第一链,以50ul总反应体系进行逆转录,体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA,1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析,保证了产品的质量。
蛋白制备:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人关节软骨组织裂解液,离心去除组织碎片,通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度,组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF,-80度保存。

 

实验要点及说明;

1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

 

操作要点;

1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内*解冻,使细胞能尽快通过易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。
6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

Super Fluor 6 SE1 mgRanolazine956355雷诺嗪

Super Fluor 75mgTelmisartan14418替米沙坦

Super Fluor 7 SE1 mg((2-cyclopropyl-(4-fluorophenyl)quinolin-yl)methyl)triphenylphosphonium bromide15578

DiR化物mgAcetyl meldrum's acid8593

腔肠素native2ug5-Chloro-methoxy-oxo,2-dihydropyridine-carbonitrile14761
Epigoitrin  1072-93-1  中文名:表告依春  分子式:C5H7NOS    Humanai-endothelialcellaibody,AECAELISAKit 人抗内皮细胞抗体(AECA)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

Senkyunolide I  94596-28-8  中文名:  分子式:C12H16O4    Humandesmogleins1,DGS-E1ELISA试剂盒人桥粒芯糖蛋白-1(DGS-E1)ELISA试剂盒规格:96T/48T

Ginsenoyne K  141947-42-4  中文名:  分子式:C17H24O3    组织MAPKAPKINASE5激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20

Panaxydiol  63910-76-9  中文名:  分子式:C17H24O2    HumanPhosphorylatedadenosinemonophosphateactivatedproteinkinase,AMPKELISAKit0酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA试剂盒规格:96T/48T

Falcarinol  21852-80-2  中文名:  分子式:C17H24O    兔子神经营养因子4(-4)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
日蟾毒它灵 HPLC98% 20mg Humaerminaldeoxynucleotidylansferase,TdTELISAKit人末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)ELISA试剂盒规格:96T/48T

日当药黄素 HPLC98% 20mg HumaestoteronerecepterELISAKit人睾同受体()ELISA试剂盒规格:96T/48T

鞣花酸 HPLC98% 20mg HumaetanusAibodyELISAKit人破伤风抗体(TetanusAb)ELISA试剂盒规格:96T/48T

肉苁蓉苷A HPLC98% 20mg Humaetinoblastomatumorsuppressorprotein,pRBELISAKit 人视网膜母细胞瘤抑制蛋白(pRB)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

肉豆寇酸单甘油酯 HPLC98% 20mg Humaetinoicacidinduciblegene/RIG-likereceptor,RLR-9ELISAKit 人视黄酸诱导基因/RIG-1样受体(RLR)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

肉豆蔻醚 HPLC98% 20mg Humaetinolbindingprotein,RBPELISAKit 人视黄醇结合蛋白(RBP)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

肉豆蔻木脂素 HPLC98% 20mg Huma-Hglycoprotein,THPELISAKitTH糖蛋白(THP)ELISA试剂盒规格:96T/48T

肉豆蔻酸 HPLC98% 20mg Humahioredoxieductase,xRELISAKit人硫氧还蛋白还原酶(xR)ELISA试剂盒规格:96T/48T

肉豆蔻酸甘油三酯 HPLC98% 20mg Humahioredoxin,xELISAKit人硫氧化还原蛋白(x)ELISA试剂盒规格:96T/48T

肉桂醇 HPLC98% 20mg Humahrombieceptor,ELISAKit 人凝血酶受体()ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
人脐动脉组织提取物培养兔乳铁传递蛋白elisa试剂盒   兔乳铁传递蛋白试剂盒   规格型号:96T/48T   兔乳铁传递蛋白试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:兔乳铁传递蛋白试剂盒、兔乳铁传递蛋白elisa试剂盒   保存条件:2-8   保质期:6个月。  5-Androsten-3β-ol-17-one ethyleneketal  7745-40-6  中文名:  分子式:C21H32O3  度:98.0%   

兔乳铁传递蛋白/乳铁蛋白(LF/LTF)ELISAkit     5-Aminouracil  932-52-5  中文名:5-氨基尿嘧啶  分子式:C4H5N3O2  度:98.0%   

兔溶菌酶(LZM)ELISAKit     5-Aminosalicylic acid  中文名:5-氨基水杨酸  分子式:C7H7NO3  度:98.0%

兔热休克蛋白90elisa试剂盒   兔热休克蛋白90试剂盒   规格型号:96T/48T   兔热休克蛋白90试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:兔热休克蛋白90试剂盒、兔热休克蛋白90 elisa试剂盒   保存条件:2-8   保质期:6个月。  5-Benzimidazolecarboxylic acid  15788-16-6  中文名:5-苯并咪唑甲酸  分子式:C8H6N2O2 

兔热休克蛋白90(HSP-90)ELISA试剂盒              5-Benzoylpentanoic acid  中文名:5-苯甲酰基戊酸  分子式:C12H14O3

运输和保存;
视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满*培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。

 

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