人直肠平滑肌细胞提取物说明书

人直肠平滑肌细胞提取物【Human Rectum: Normal Rectal Smooth Muscle Cell Derivatives】

人直肠平滑肌细胞提取物是从人原代直肠平滑肌细胞提取的，人原代直肠平滑肌细胞从正常人直肠组织制备。正常人直肠组织采集自各地方医院，采集工作根据IRB 和 HIPAA批准的方案进行。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆，表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。

总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。
cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA第一链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证了产品的质量。
蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人关节软骨组织裂解液，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。 

我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌；部分产品现货，超低比价，产品名称货期短，价格优，售后齐全。

细胞培养方法：
1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；
③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；
⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）
②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；
④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

实验事项：

1. 试剂准备：所有试剂都必须在使用前达到室温，使用后请立即按照说明书要求保存试剂。  实验操作中请使用一次性的吸头，避免交叉污染。
2.   加样：加样或加试剂时，请注意在吸取标本 / 标准品，酶结合物或底物时，前一个孔与后一个孔加样之间的时间间隔如果太大，将会导致不同的“预孵育"时间，从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。一次加样时间(包括标准品及所有样品)好控制在10分钟内，如标本数量多，推荐使用多道移液器加样。
3.   孵育：为防止样品蒸发，试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内，酶标板加上盖或覆膜，以避免液体蒸发；洗板后应尽快进行下步操作，任何时侯都应避免酶标板处于干燥状态;同时应严格遵守给定的孵育时间和温度。
4.   洗涤：洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干，勿将滤纸直接放入反应孔中吸水，同时要消除板底残留的液体和手指印，避免影响后的酶标仪读数。
5.  试剂配制：Detection A及Detection B在使用前请手甩几下或少时离心处理，以使管壁或瓶盖的液体沉积到管底。标准品、检测溶液A工作液、检测溶液B工作液请依据所需的量配置使用，并使用相应的稀释液配制，不能混淆。请确配置标准品及工作液，尽量不要微量配置(如吸取检测溶液A时，一次不要小于10μl)，以避免由于不准确稀释而造成的浓度误差；请勿重复使用已稀释过的标准品、检测溶液A工作液或检测溶液B工作液。
6.  反应时间的控制：加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化(比如，每隔10分钟)，如颜色较深，请提前加入终止液终止反应，避免反应过强从而影响酶标仪光密度读数。
7.  底物：底物请避光保存，在储存和温育时避免强光直接照射。
    建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。
    如标本中待测物质含量过高，请先稀释后再测定，计算时请后乘以稀释倍数。

注意事项：

1. 接收到，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张）。
2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。
3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。
6.1000rpm，5min离心，重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。 

猪圆环病毒PCR检测试剂盒/p-Nitrohydrocinnamic acid166429

猪圆环病毒1型和2型双重实时荧光PCR检测试剂盒Plerixafor octahydrobromide1551482普乐沙福氢盐

猪圆环病毒1型实时荧光PCR检测试剂盒Pitavastatin ethyl ester16739

猪圆环病毒2型实时荧光PCR检测试剂盒Pitavastatin calcium1475262匹伐他汀钙

猪传染性胃肠炎、猪流行性腹泻、猪轮状病毒三重实时荧光RT-PCR检测试剂盒Pirfenidone531793哌非尼酮
Pioglitazone hydrochloride  112529-15-4  中文名：盐酸吡格列酮  分子式：C19H21ClN2O3S  度：98.0%  关键词：    小鼠内皮细胞生长因子D   英文名称：   vascuiar endothelial growth factor D   规格：   48T/96T   英文缩写：   VEGF-D

Pilosol A  501086-15-3  中文名：  分子式：C13H12O  度：%  关键词：    小鼠内皮细胞生长因子受体1   英文名称：   vascuiar endothelial growth factor receptor 1   规格：   48T/96T   英文缩写：   VEGF-R1

Pidotimod  121808-62-6  中文名：匹多莫德  分子式：C9H12N2O4S  度：98.0%  关键词：    小鼠内皮生长因子受体 -1(mouse VEGF-R1)   作用：   ELISA   规格：   96T   美国 R&D

Physapruin A  155178-03-3  中文名：  分子式：C28H38O7  度：96.5%  关键词：  毒性; 酸浆属; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库  小鼠内皮生长因子受体 2(mouse VEGF-R2)   作用：   ELISA   规格：   96T   美国 R&D

Physaminimin C  1582259-03-7  中文名：  分子式：C28H38O8  度：98.0%  关键词：    大鼠Active Caspase-3   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装
紫背金牛酸 HPLC≥98% 5mg Rat follistatin (FS) ELISA Kit 大鼠卵泡抑素(FS)ELISA试剂盒

紫丹参萜醚 HPLC≥98% 5mg Rat fractalkine (FK) ELISA Kit 大鼠趋化因子(FK)ELISA试剂盒

紫铆因 HPLC≥98% 5mg Rat galanin / galanin (GAL) ELISA Kit 大鼠甘肽/甘素(GAL)ELISA试剂盒

紫杉素 B HPLC≥98% 5mg Rat Gao Min three iodothyronine (u-T3) ELISA Kit 大鼠高敏*状腺原氨酸(u-T3)ELISA试剂盒

左旋哈氏豆属酸 HPLC≥98% 5mg Rat gelsolin (Gelsolin) ELISA Kit 大鼠凝溶胶蛋白(Gelsolin)ELISA试剂盒

左旋马尾松树脂醇 HPLC≥98% 5mg Rat glamic acid decarboxylase aoaibody (GAD-Ab) ELISA Kit 大鼠谷氨酸脱羧酶自身抗体(GAD-Ab)ELISA试剂盒

()N甲基石榴碱 HPLC≥98% 5mg Rat Glucose depende insulinoopic polypeptide (GIP) ELISA Kit 大鼠葡萄糖依赖性胰岛素释放多肽(GIP)ELISA试剂盒

()vibo环己五醇 HPLC≥98% 5mg Rat granulocyte colony stimulating factor (G-CSF) ELISA Kit 大鼠粒细胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA试剂盒

()白花前胡甲素 HPLC≥98% 5mg Rat Granulocyte macrophage colony stimulating factor (GM-CSF) ELISA Kit 大鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA试剂盒

()白花前胡乙素 HPLC≥98% 5mg Rat granzyme A (Gzms-A) ELISA Kit 大鼠颗粒酶A(Gzms-A)ELISA试剂盒
人直肠平滑肌细胞提取物说明书Senkyunolide I  中文名：  分子式：C12H16O4    总蛋白定量测定试剂盒（带标准：BCA法）（微板法）

Senkyunolide H  中文名：  分子式：C12H16O4    总蛋白（TP）测定试剂盒（带标准：双缩脲法）                 

Senkyunolide G  中文名：洋川芎内酯G  分子式：C12H16O3    植物维生素Aelisa试剂盒   植物维生素A试剂盒   规格型号：96T/48T   植物维生素A试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：植物维生素A试剂盒、植物维生素A elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

Senkyunolide E  中文名：  分子式：C12H12O3    大鼠白三烯B4elisa试剂盒   大鼠白三烯B4试剂盒   规格型号：96T/48T   大鼠白三烯B4试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：大鼠白三烯B4试剂盒、大鼠白三烯B4 elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

Senkyunolide C  中文名：洋川芎内酯C  分子式：C12H12O3    大鼠金属硫蛋白elisa试剂盒   大鼠金属硫蛋白试剂盒   规格型号：96T/48T   大鼠金属硫蛋白试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：大鼠金属硫蛋白试剂盒、大鼠金属硫蛋白elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。