人脂肪细胞提取物说明书

人脂肪细胞提取物【Human Fat: Normal Adipose Cells Derivatives】

人脂肪细胞提取物是从人原代脂肪细胞提取的，人原代脂肪细胞从正常人脂肪组织制备。正常人脂肪组织采集自各地方医院，采集工作根据IRB 和 HIPAA批准的方案进行。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆，表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。

总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。
cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA第一链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证了产品的质量。
蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人关节软骨组织裂解液，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。 

 实验要点及说明：

1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

 运输和保存：

视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满*培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。

操作要点：

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

犬腺病毒1型实时荧光PCR检测试剂盒Oxytetracycline hydrochloride586盐酸土霉素

犬腺病毒2型实时荧光PCR检测试剂盒Oxymetholone4347康复龙

犬呼肠孤病毒RT-PCR检测试剂盒/Oxiracetam626132奥拉西坦

犬副流感病毒RT-PCR检测试剂盒/Oxaprozin212568奥沙普秦

犬副流感病毒实时荧光RT-PCR检测试剂盒Oxandrolone539氧甲氢龙
Methyl 4'-methylbiphenyl-2-carboxylate  114772-34-8  中文名：  分子式：C15H14O2    人转录因子   英文名称：   Human Engrailed-2   规格：   48T/96T   英文缩写：   EN-2

4-Methyl-2-propyl-1H-benzimidazole-6-carboxylic acid  152628-03-0  中文名：  分子式：C12H14N2O2    E选择素   英文名称：   Human E selectin   规格：   48T/96T   英文缩写：   ES

Androstenediol  521-17-5  中文名：雄烯二醇  分子式：C19H30O2    上皮钙粘蛋白   英文名称：   Human E.cadherin   规格：   48T/96T   

Testosterone benzoate  2088-71-3  中文名：17-安息香酸雄烯醇酮  分子式：C26H32O3    内皮素受体A   英文名称：   Human Endothelin Receptor A   规格：   48T/96T   英文缩写：   EA

Norandrostenedione  734-32-7  中文名：19-去甲-4-雄烯二酮  分子式：C18H24O2    人转录激活因子4(ATF4)酶联吸附测定试剂盒   Human ATF4 (Activating anscription Factor 4) ELISA Kit
盐酸哌唑嗪  Prazosin HCl  质量规格：>99%,BR 大鼠坏死因子可溶性受体Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)试剂盒 Rat Tumor necrosis factor soluble receptor Ⅱ,TNFsR-Ⅱ ELISA KIT

醋酸泼尼松龙  Prednisolone acetate  质量规格：>97%,USP,BR 大鼠坏死因子受体超家族成员11A(TNFRSF11A/RANK)试剂盒 Rat tumor necrosis factor receptor superfamily member 11A,TNFRSF11A/RANK ELISA kit

醋酸泼尼松  Prednisone Acetate  质量规格：>98%,BR 大鼠坏死因子相关凋亡诱导配体(AIL)试剂盒 Rat tumor necrosis factor-related apoptosis inducing ligand,AIL ELISA Kit

醋酸泼尼松（标准品）  Prednisone Acetate  质量规格：HPLC>98%,标准品 大鼠坏死因子相关凋亡诱导配体受体1(AIL-R1)试剂盒 Rat AIL-R1 ELISA Kit

普瑞巴林  Pregabalin  质量规格：>99%,S构型 大鼠坏死因子相关凋亡诱导配体受体3(AIL-R3)试剂盒 Rat AIL R3 ELISA Kit

盐酸丙卡巴肼/盐酸甲基苄肼  Procarbazine HCl  质量规格：>98.5%,USP,BR,可用于细胞培养  大鼠坏死因子相关凋亡诱导配体受体4(AIL-R4)试剂盒 Rat AIL-R4 ELISA Kit

盐酸丙卡巴肼(标准品)  Procarbazine HCl  质量规格：HPLC>98%,标准品 大鼠坏死因子诱导蛋白6(TSG-6)试剂盒 Rat tumor necrosis factor-inducible gene 6 protein,TSG-6 elisa kit

盐酸丙卡特罗  Procaterol HCl  质量规格：>98.5%,CP2005,半水合物 大鼠环0酸腺苷(cAMP)ELISA检测试剂盒Ratcyclicadenosinemonophosphate,cAMPELISAKit 96T/48T

丙泊酚  Propofol  质量规格：>98.0%,熔点18 大鼠环孢素A(CsA)ELISA检测试剂盒RatCyclosporineA,CsAELISAKit 96T/48T

盐酸雷洛昔芬  Raloxifene HCl  质量规格：>98.5%,BR 大鼠黄体生成素释放激素(LHRH)ELISA检测试剂盒RatLeinizingHormone-ReleasingHormone,LHRHELISAKit 96T/48T
人脂肪细胞提取物说明书α-Spinasterol acetate  中文名：α-菠甾醇乙酸酯  分子式：C31H50O2    血清铁检测   Copper blue protein (CP) detection

α-Spinasterol  中文名：α-菠甾醇  分子式：C29H48O    总铁结合力（TIBC）检测   5 'nucleotide enzyme (5' ) detection

α-Lipoic acid  中文名：α-硫辛酸  分子式：C8H14O2S2    铜兰蛋白（CP）检测   Glamate detection              

α-Lapachone  中文名：  分子式：C15H14O3    游离脂肪酸含量测试盒   可见分光光度法   50管/48样

α-D-Glucose  中文名：α-D-葡萄糖  分子式：C6H12O6    脂肪酶（LPS）测试盒   可见分光光度法   50管/48样