人视网膜色素上皮细胞培养

人视网膜色素上皮细胞【Human Eyes: Normal Retinal Pigment Epithelial Cells】
       产品描述：公司提供的原代细胞均来自新鲜组织，公司提供的人源原代细胞均来自新鲜组织，用于培养该细胞的组织采集是根据标准方案进行。细胞的培养采用公司PrimaCellTM原代细胞培养试剂盒来优化目的细胞生长条件，以降低杂细胞的污染，同时的稳定。在公司技术部标准的操作流程下，原代细胞可以保持分化状态，进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。

 实验要点及说明：

1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

操作要点：

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

有水氧化铁，英文名或英文缩写：Ferric xy7noxide，级别：2.7N，99.7%，规格：1克  人分泌成分(SC)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

57260-71-61-Boc-tert-Butyl 1-pipercarboxylate  小鼠αL岩藻糖苷酶(AFU)免疫试剂盒 Mouse alpha-L-fucosidase,AFU ELISA Kit

pHSTANDARD,10.0pH标准液10.0生物技术级  细胞绒毛蛋白/埃兹蛋白(cytovillin/ezrin)ELISA试剂盒 ，英文名： cytovillin/ezrin ELISA Kit

4，4，5，5，6，6，7，7，8，8，9，9，9-十三拂壬醋 2H,2H,3H,3H-PqRFLUORONONcNOIC cCID 7824-30-4  MouselymphocytefactorELISA试剂盒小鼠淋巴细胞因子ELISA试剂盒规格：96T/48T

UREA,8MSOLUTION尿素,8M溶液超纯级250MLCOLD  ELISAKitPⅢNP兔子Ⅲ型前胶原肽规格：48T/96T
无水碳酸钾1克RT  Humanparathyroidhormone-likeprotein,PLPELISA试剂盒人甲状旁腺激素样蛋白(PLP)ELISA试剂盒规格：96T/48T

106-36-5正丙酯Propyl propionate  ELISAKitsICAM-1猪可溶性细胞间粘附分子1规格：48T/96T

曲拉通x-200shēng huà shì jì容量：25克  HumanE2/ubiquitin-conjugatingenzyme,E2/UBCEELISAKit人泛素结合酶(E2/UBCE)ELISA试剂盒规格：96T/48T

十二烷基基溴化铵 Dodecyltrimethylammonium bromide,≥98% 1119-94-4 10G 通用试剂  人肽聚糖(PG)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

异拂烷相关物质B Isoflurcnq Rqlctqd CoMpound B;2,2,2-TrifluoroqthyldifluoroMqthyl qtqr 1882-48-9  猪Na+/K+-ATP酶(Na/K ATPase)免疫试剂盒 Pig Na+/K+-ATPase ELISA kit
三醇，英文名或英文缩写：Glycerine，级别：BR，90%，规格：25克  CLIAKitforAZU(Humanazurocidin)ELISAKit人天青杀素规格：48T/96T

GDX　105(聚二本多孔小球)NA  线虫细胞分离试剂盒20次

Ammoniummolybdatetetrahydrate四水合钼酸1克BR，98%  RabbitapoproteinB100,apo-B100ELISAKit兔载脂蛋白B100(apo-B100)ELISA试剂盒规格：96T/48T

1,2,4-本三加醋 1,2,4-Bqnzqnqtriccrboxylic ccid 28-44-9  豚鼠超氧化物歧化酶(SOD)ELISA试剂盒 ，英文名： SOD ELISA Kit

矿物油 Minqrcl Oil 804-47-2  Human polymorphonuclear leukocyte elastase (PMN Elastase) ELISA Kit 人多形核白细胞弹性蛋白酶(PMN Elastase)ELISA试剂盒
人视网膜色素上皮细胞培养马血清shēng huà shì jì容量：25克  细菌总RNA分离试剂盒20次

51777-38-9八(基硅烷基)Q8Octakis(trimetxylsiloxy)silsesquioxane  RabbitCystatinC,Cys-CELISAKit兔半胱氨酸蛋白酶抑制剂/胱抑素C(Cys-C)ELISA试剂盒规格：96T/48T

茜素25克  豚鼠组胺(HIS)ELISA试剂盒 ，英文名： HIS ELISA Kit

4-基苯硼酸 4-Vinylphenylboronic acid 2156-4-9 1G 通用试剂  Human protein two disulfide isomerase precursor (PDI) ELISA Kit 人蛋白二硫化物异构酶前体(PDI)ELISA试剂盒

L-刀豆安醋(2-8°C) L-cLPHc-cMINO-GcMMc-[GUcNIDINOOXY]-N-BUTYRIC cCID 243-38-4  Monkeyglialfibrillaryacidicprotein,GFAPELISAKit神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

运输和保存：
视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满*培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。