人角膜成纤维细胞说明书

人角膜成纤维细胞【Human Eyes: Normal Corneal Fibroblasts】

       产品描述：公司提供的原代细胞均来自新鲜组织，公司提供的人源原代细胞均来自新鲜组织，用于培养该细胞的组织采集是根据标准方案进行。细胞的培养采用公司PrimaCellTM原代细胞培养试剂盒来优化目的细胞生长条件，以降低杂细胞的污染，同时的稳定。在公司技术部标准的操作流程下，原代细胞可以保持分化状态，进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。

 实验要点及说明：

1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

 运输和保存：

视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满*培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。

操作要点：

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

原钒酸钠shēng huà shì jì容量：保存：-20℃100毫克  小鼠Ⅰ型胶原(Col Ⅰ)ELISA试剂盒 ，英文名： Col Ⅰ ELISA Kit

17435-72-22-(溴甲基)酸乙酯etxyl 2-(BROMOmetxYL)ACRYLATE  植物激素脱落酸(ABA)ELISA检测试剂盒Plahormoneabscisicacid,ABAELISAKit 96T/48T

ACRYLAMIDE,40%(W/V)SOLUTION酰胺,40%溶液蛋白组学级500MLCOLD  人CCAAT增强子结合蛋白ε(C/EBPε)免疫试剂盒 Human CCAAT/enhancer binding protein epsilon,C/EBPε ELISA Kit

2-录-6-基本安 2-Chloro-6-mqthylcnilinq 87-63-8  英文名称Mousethyroopin-releasinghormoneELISAKIT小鼠促甲状腺素释放激素(H)规格：96T/48T

TWEEN20,PEROXIDEFREE,10%吐温20溶液蛋白组学级5 Pack9005-64-5RT  冰冻切片细胞色素C氧化酶活性染色试剂盒50次
五氧化二shēng huà shì jì容量：RT25克  小鼠Toll样受体9(TLR9)ELISA试剂盒 ，英文名： TLR9 ELISA Kit

PH缓冲液　PH13.0(20℃)NA  人凝血因子ⅩⅢ(FⅩⅢ)ELISA检测试剂盒HumancoagulationfactorⅩⅢ,FⅩⅢELISAKit 96T/48T

色胺100克  大鼠活性氧(ROS)免疫试剂盒 Rat Reactive OXyen Species,ROS ELISA Kit

2-酚-3,7-二磺酸... 2-Naphthol-3,7-disulfonic a... 83949-45-5 1G 通用试剂  英文名称RatCXCL10ELISAKit大鼠B-淋巴细胞趋化因子10(CXCL11)规格：96T/48T

肖醋(*) litxium nitnctq   离体培养愈伤组织再生(callogenesis)培养基500毫升溶液/片剂
三号，英文名或英文缩写：Sudan Ⅲ，级别：BR，98%，规格：25克  乙酰乙酸(ACAC)ELISA试剂盒 ，英文名： ACAC ELISA Kit

(溶菌酶)  Mousealpha-granularmembraneprotein,GMP-140ELISA试剂盒小鼠血浆α颗粒膜蛋白(GMP-140)ELISA试剂盒规格：96T/48T

Chromicchloridehexahydrate三录化1克AR  ELISAKitPKB小鼠蛋白激酶B规格：48T/96T

铍试剂II;8-羌基-3,6-二磺醋(1-偶氮-2′)-1′,8′-二羌基-3′,6′-二磺醋四内盐;H醋偶氮变色醋内;2-(8-羌基-3,6-二磺醋内偶氮)-1,8-二羌基-3,6-二磺醋内 Bqryllon II;Bqrillon II;Bqryllion 21220-2-2  Human1,3-Disphosphoglycerate,1,3-DPGELISAKit人1,3-二甘油酸(1,3-DPG)ELISA试剂盒规格：96T/48T

考马斯亮蓝 R-250 Brilliant Blue R-250 (Dye content, ≥9... 6104-59-2 5G 染色剂  人抗肺泡基底膜抗体(ABM-Ab)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人角膜成纤维细胞说明书麦芽浸膏汤100克  兔血管生成素2(ANG-2)免疫试剂盒 Rabbit Angiopoietin 2,ANG-2 ELISA Kit

7783-85-9亚铁铵;马尔氏盐;低铁矾;亚铁铵矾;低铁铵;六水合亚铁铵;亚铁铵;六水合铁铵;六水合铁(Ⅱ)铵Ferrous aluM;Ferrous aMMoniuM sulfate;Mohr'salt  羟甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(HMG-CoAR)ELISA试剂盒 ，英文名： HMG-CoAR ELISA Kit

分子筛5A型500U  RabbitFibrinogen,FbgELISA试剂盒兔血纤蛋白原(Fbg)ELISA试剂盒规格：96T/48T

2-羟基乙基苯甲基硫醚 2-Hydroxyethyl-benzyl sulphide,98% 26524-88-9 5G 通用试剂  Humanai-neuophilaibody,ANAELISA试剂盒人抗中性粒细胞抗体(ANA)ELISA试剂盒规格：96T/48T

硼酸铵/硼酸氢铵/偏硼酸铵/四硼酸铵/Ammonium borate CP，99% 250克 国产/进口  HumanCaspase-9,Casp-9ELISAKit人胱天蛋白酶9(Casp-9)ELISA试剂盒规格：96T/48T