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大鼠滑膜细胞提取物培养

大鼠滑膜细胞提取物培养
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大鼠滑膜细胞提取物培养在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
  大鼠滑膜细胞提取物培养的详细资料:

产品名称

大鼠滑膜细胞提取物培养

英文名称

Rat Bone Joint: Normal Synovial Cell Derivatives

货号

EYX99217

大鼠滑膜细胞提取物【Rat Bone Joint: Normal Synovial Cell Derivatives

大鼠滑膜细胞提取物是从大鼠滑膜细胞提取的,大鼠滑膜细胞从正常大鼠滑膜组织制备。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆,表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。

 总RNA制备:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。

cDNA制备:纯化后的总RNA来合成cDNA第一链,以50ul总反应体系进行逆转录,体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA,1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析,保证了产品的质量。
蛋白制备:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人关节软骨组织裂解液,离心去除组织碎片,通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度,组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF,-80度保存。

 

 实验要点及说明:

1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

 

操作要点:

1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内完全解冻,使细胞能尽快通过易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。
6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

磺胺脒ELISA试剂盒N,N'-Bis(salicylidene),3-propanediamine10N,N-(亚水杨基),3-丙二胺

磺胺噻唑ELISA试剂盒N,N'-Bis(acetoacetyl)-o-toluidine916N,N'-(乙酰乙酰基)

洛美沙星ELISA试剂盒N,N'-Bis(2-hydroxyethyl)oxamide18719N,N'-(2-羟乙基)草酰胺

培氟沙星ELISA试剂盒N,N-Bis(2-chloroethyl)-p-sulphonamide421378N,N-(2-氯乙基)对甲苯磺酰胺

青霉素G ELISA试剂盒N-(Quinoxalin-yl)-(quinoxalin-ylamino)benzenesulfonamideNO
HumanDeoxypyridinolinecrosslinks,DPDELISA试剂盒人脱氧胶原交联(DPD)ELISA试剂盒规格:96T/48T  1-Benzyl L-aspartate  中文名:L-天冬氨酸1-苄酯  分子式:C11H13NO4 

Humandeoxypyridinoline,DPDELISA试剂盒人脱氧酚/脱氧啉(DPD)ELISA试剂盒规格:96T/48T  1-Benzyl D-aspartate  79337-40-9  中文名:D-天冬氨酸1-苄酯  分子式:C11H13NO4 

Humandenguefeveraibody,DFELISA试剂盒人登革热抗体(DF-Ab)ELISA试剂盒规格:96T/48T  1-Benzyl-5-ethoxyhydantoin  65855-02-9  中文名:1-苄基-5-乙氧基海因  分子式:C12H14N2O3 

Humandeltasleep-inducingpeptide,DSIPELISA试剂盒人促睡眠肽(DSIP)ELISA试剂盒规格:96T/48T  1-Benzylimidazole  中文名:1-苄基咪唑  分子式:C10H10N2 

HumanDehydroepiandrosteronesulfate,DHEA-SELISA试剂盒人脱氢表雄同酯(DHEA-S)ELISA试剂盒规格:96T/48T  1-Chloroethyl cyclohexyl carbonate  中文名:  分子式:C9H15ClO3
脱水泽泻醇F HPLC95% 20mg Ratgalanin,GALELISAKit大鼠甘肽/甘素(GAL)ELISA试剂盒规格:96T/48T

泽泻醇O HPLC95% 20mg Ratgalanin,GALELISA试剂盒大鼠甘肽/甘素(GAL)ELISA试剂盒规格:96T/48T

泽泻醇 K 醋酸酯 HPLC95% 20mg RatGamma-aminobyricacid,GABAELISAKit大鼠γ氨基(GABA)ELISA试剂盒规格:96T/48T

去乙酰泽泻醇O HPLC95% 20mg RatGamma-aminobyricacid,GABAELISA试剂盒大鼠γ氨基(GABA)ELISA试剂盒规格:96T/48T

刻叶紫堇胺 HPLC95% 20mg RatGasoiestinalcancerMarker-CA199ELISAKit大鼠胃肠癌标志物CA199ELISA试剂盒规格:96T/48T

()二氢槲皮素 HPLC95% 20mg RatGasoiestinalcancerMarker-CA199ELISA试剂盒大鼠胃肠癌标志物CA199ELISA试剂盒规格:96T/48T

桑根酮K HPLC95% 20mg RatGATAbindingprotein4,GATA4ELISAKit大鼠GATA结合蛋白4(GATA4)ELISA试剂盒规格:96T/48T

环桑素 HPLC95% 20mg RatGATAbindingprotein4,GATA4ELISA试剂盒大鼠GATA结合蛋白4(GATA4)ELISA试剂盒规格:96T/48T

,二甲氧基,','三羟基黄酮 HPLC95% 20mg RatGelsolinELISAKit大鼠凝溶胶蛋白(Gelsolin)ELISA试剂盒规格:96T/48T

小构树醇A HPLC95% 20mg RatGelsolinELISA试剂盒大鼠凝溶胶蛋白(Gelsolin)ELISA试剂盒规格:96T/48T
大鼠滑膜细胞提取物培养人纤维蛋白(FBL)酶联吸附测定试剂盒   Human FBL (Fibrillarin) ELISA Kit  3,5-Di-O-caffeoylquinic acid  中文名:异绿原酸分子式:C25H24O12  度:98.0%

人纤溶抑制因子(TAFI)酶联吸附测定试剂盒   Human TAFI (Thrombin Activatable Fibrinolysis Inhibitor) ELISA Kit  3,6-Bis(hydroxymethyl)durene  7522-62-5  中文名:3,6-(羟甲基)杜烯  分子式:C12H18O2 

人细胞外基质0酸糖蛋白elisa试剂盒   人细胞外基质0酸糖蛋白试剂盒   规格型号:96T/48T   人细胞外基质0酸糖蛋白试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:人细胞外基质0酸糖蛋白试剂盒、人细胞外基质0酸糖蛋白elisa试剂盒   保存条件:2-8   保质期:6个月。  2-Chloro-11-cyclopentyl-5H-benzo[e]pyrimido[5,4-b][1,4]diazepin-6(11H)-one  1521197-43-2  中文名:  分子式:C16H15ClN4O 

人细胞色素P450c21B/21-羟化酶(CYP21B)ELISAKit     2-Aminophenyl phenyl sulfide  1134-94-7  中文名:2-氨基二苯硫醚  分子式:C12H11NS 

人细胞色素P450c21A/21-羟化酶(CYP21A)ELISAKit     2-Aminonicotinic acid  中文名:2-氨基烟酸  分子式:C6H6N2O2  度:98.0%

运输和保存:
视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。

 

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