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大鼠心肌组织提取物培养

大鼠心肌组织提取物培养
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大鼠心肌组织提取物培养在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
  大鼠心肌组织提取物培养的详细资料:

产品名称

大鼠心肌组织提取物培养

英文名称

Rat Heart: Normal Heart Derivatives

货号

EYX99425

大鼠心肌组织提取物【Rat Heart: Normal Heart Derivatives

心肌分布在心和邻近心的大血管根部。心肌主要由心肌纤维构成,期间有结缔组织、心血管和神经。心肌收缩有自主节律性,缓慢而持久。公司科技提供来自新鲜或冷冻大鼠心肌组织中高质量的总RNAPCR准备的第一条cDNA链,蛋白质及其亚组分。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆,表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。

总RNA制备:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。
cDNA制备:纯化后的总RNA来合成cDNA第一链,以50ul总反应体系进行逆转录,体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA,1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析,保证了产品的质量。
蛋白制备:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人关节软骨组织裂解液,离心去除组织碎片,通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度,组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF,-80度保存。

 

实验要点及说明;

1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

 

操作要点;

1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内完全解冻,使细胞能尽快通过最易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。
6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

Cholesterol 胆固醇   g 2-(Cyanomethyl)benzimidazole441482-甲基苯并咪唑

CMP 胞苷 5-单磷酸   0mg2-(Chloromethyl)-methylquinazoline91132

Congo red 刚果红   5g2-(7-Methoxy-naphthyl)ethylamine hydrochloride1395257

Coomassie brilliant blue G 考马斯亮蓝G   5g2-(5-Chloro-phenoxyphenyl)acetic acid95

Coomassie brilliant blue R 考马斯亮蓝R   5g2-(4-Chloro-hydroxy-butynyl)-(1,3-pentadiynyl)thiophene26
Convallatoxin  中文名:铃兰毒苷  分子式:C29H42O10  度:98.0%  兔生成素2elisa试剂盒   兔生成素2试剂盒   规格型号:96T/48T   兔生成素2试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:兔生成素2试剂盒、兔生成素2 elisa试剂盒   保存条件:2-8   保质期:6个月。

Cynanoside F  中文名:  分子式:C41H62O15  度:98.0%  兔内皮细胞粘附分子1elisa试剂盒   兔内皮细胞粘附分子1试剂盒   规格型号:96T/48T   兔内皮细胞粘附分子1试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:兔内皮细胞粘附分子1试剂盒、兔内皮细胞粘附分子1 elisa试剂盒   保存条件:2-8   保质期:6个月。

Periplocoside F  中文名:  分子式:C63H104O23  度:98.0%  兔内皮细胞生长因子elisa试剂盒   兔内皮细胞生长因子试剂盒   规格型号:96T/48T   兔内皮细胞生长因子试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:兔内皮细胞生长因子试剂盒、兔内皮细胞生长因子elisa试剂盒   保存条件:2-8   保质期:6个月。

7α-Methoxy-5α,6α-epoxyergosta-8(14),22-dien-3β-ol  中文名:  分子式:C29H46O3  度:97.5%  兔紧张素Ⅱelisa试剂盒   兔紧张素Ⅱ试剂盒   规格型号:96T/48T   兔紧张素Ⅱ试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:兔紧张素Ⅱ试剂盒、兔紧张素Ⅱ elisa试剂盒   保存条件:2-8   保质期:6个月。  

Minisecolide C  中文名:  分子式:C28H34O7  度:兔生成素2(ANG-2)ELISA试剂盒
奈比洛尔盐酸盐;奈必洛尔  Nebivolol hydrochloride  质量规格:>99%,BR 人结合珠蛋白/触珠蛋白(Hpt/HP)试剂盒 Human Hpt/HP ELISA KIT

奈必洛尔(标准品)  Nebivolol hydrochloride  质量规格:HPLC>99%,标准品 人结核菌杆(TB)抗体(IgA)试剂盒 Human tuberculosis(TB)aibody(IgA)ELISA kit

核固红  Nuclear fast red  质量规格:BS 人结核菌杆抗体IgG(TB-Ab IgG)试剂盒 Human tuberculosis aibody IgG,TB-Ab IgG ELISA Kit

胭脂红  Carmine  质量规格:BS,用于生物学染色 人结核菌杆抗体IgM(TB-Ab IgM)试剂盒 Human tuberculosis aibody IgM,TB-Ab IgM ELISA Kit

酚红  Bromophenol red  质量规格:AR 人结核菌素(Tuberculin)试剂盒 Human Tuberculin ELISA Kit

丽春红2R(BS)  Ponceau 2R  质量规格:BS 人睫状神经营养因子(CF)试剂盒 Human CF ELISA Kit

孟加拉玫瑰红,酸性红94  Rose bengal  质量规格:AR 人解脲脲原体抗体(UU-Ab)ELISA检测试剂盒HumanUreaplasmaurealyticumaibody,UU-AbELISAKit 96T/48T

偶氮荧光桃红,酸性红1  Azophloxine  质量规格:BS 人解脲脲原体抗体(UU-Ab)试剂盒 Human ureaplasma urealyticum(UU)aibody ELISA kit

曙红Y,醇溶剂红 43  Eosin Y ,alcohol solution  质量规格:AR 人解整合素样金属蛋白酶10(ADAM10)试剂盒 Human A Disiegrin And Metalloprotease 10,ADAM10 ELISA Kit

曙红B  Eosin B  质量规格:BS 人解整合素样金属蛋白酶12(ADAM12)试剂盒 Human A Disiegrin And Metalloprotease 12,ADAM12 ELISA Kit
大鼠心肌组织提取物培养兔组织因子途径抑制物(TFPI)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装  2,2-Diphenylglycine  中文名:  分子式:C14H13NO2  度:98.0%

兔组织因子elisa试剂盒   兔组织因子试剂盒   规格型号:96T/48T   兔组织因子试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:兔组织因子试剂盒、兔组织因子eisa试剂盒   保存条件:2-8   保质期:6个月。  Allopurinol  315-30-0  中文名:别嘌醇  分子式:C5H4N4O  度:98.0%  关键词: 

兔组织因子   英文名称:   Rabbit Tissue Factor   规格:   48T/96T   英文缩写:   TF  Allitol  488-44-8  中文名:蒜糖醇  分子式:C6H14O6  度:关键词:  中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库

兔组织金属蛋白酶抑制因子1   英文名称:   Rabbit Tissue Inhibitor of Metalloproteinases 1   规格:   48T/96T   英文缩写:   TIMP-1  Allitol  488-44-8  中文名:蒜糖醇  分子式:C6H14O6 

组织因子(TF)ELISA试剂盒     Allyl cinnamate  1866-31-5  中文名:肉桂酸烯丙酯  分子式:C12H12O2

运输和保存;
视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。

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