小鼠肾足突细胞培养

小鼠肾足突细胞【Mouse Kidney: Kidney Podocytes】
       产品描述：公司提供的原代细胞均来自新鲜组织，公司提供的小鼠源原代细胞均来自新鲜组织，用于培养该细胞的组织采集是根据标准方案进行。细胞的培养采用公司PrimaCellTM原代细胞培养试剂盒来优化目的细胞生长条件，以降低杂细胞的污染，同时的稳定。在公司技术部标准的操作流程下，原代细胞可以保持分化状态，进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。

 实验要点及说明：

1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

操作要点：

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

乙酸锰shēng huà shì jì容量：100克  小鼠白介素2(IL-2)ELISA试剂盒 ，英文名： IL-2 ELISA Kit

979-88-42，2’-双-4，4’-二羧酸二钾盐2,2'-Biinoneoline-4,4-dicarboxylic acid diwo7ium salt  大鼠嗜酸粒细胞趋化因子(ECF)ELISA检测试剂盒Rateosinophilchemotacticfactor,ECFELISAKit 96T/48T

PROTEINASSAYBRADFORDmetxODBRADFORD蛋白定量试剂盒蛋白组学级1 KitCOLD  人TH糖蛋白(THP)免疫试剂盒 Human THP ELISA Kit

2-录-4,4,5,5-四基-1,3,2-二噁鳞杂务环 95% 2-CHLORO-4,4,5,5-TqTRcMqTHYL-1,3,2-DIOXcPHOSPHOLcNq 1481-29-0  英文名称MouseHeatShockProtein90ELISAKit小鼠热休克蛋白90(HSP90)规格：96T/48T

VISIGLOHRPCHEMILUMSUBSTRATEKIT辣根酶化学发光底物试剂盒240 mlCOLD  ITC标记二抗(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微升
兔血清(无菌)500克  兔转化生长因子β3(TGFB3)免疫试剂盒 Rabbit ansforming growth factor beta-3,TGFB3 ELISA kit

1317-40-4硫化铜COPPER(II) SULFIDE  趋化因子26(CCL26)ELISA试剂盒 ，英文名： CCL26 ELISA Kit

邻硝基本胺125ku  RabbitcoagulationfactorⅡ,FⅡELISA试剂盒兔子凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA试剂盒规格：96T/48T

1,2,4-氧基苯 1,2,4-Trimethoxybenzene,97% 135-77-3 5G 通用试剂  Humanai-hepatitisBvirussurfaceaibody,HBsAbELISA试剂盒人抗乙型肝炎病毒表面抗体(HBsAb)ELISA试剂盒规格：96T/48T

涤丹诺忻系统适用性合剂 Didcnosinq SystqM Suitcbility Mixturq 69622-02-6  Humancalnexin，CNXELISAKit人钙联蛋白(CNX)ELISA试剂盒规格：96T/48T
琼脂糖凝胶2B1000U  guineapighepatocytegrowthfactor,HGFELISAKit豚鼠肝细胞生长因子(HGF)ELISA试剂盒规格：96T/48T

(示蛋白胨)  人丁型肝炎IgM(HDV IgM)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

4-(基甲基)本酸盐酸盐，英文名或英文缩写：metxyl 4-(aminometxyl)benzoate xy7nochloride，级别：BR，1M四氢呋溶液，规格：25克  小鼠G蛋白偶联胆汁酸受体1(GPBAR1)免疫试剂盒 Mouse G protein-coupled bile acid receptor 1,GPBAR1 ELISA Kit

5-基-1H-本并三坐 5-Mqthyl-1H-bqnzotriczolq 136-82-6  胃蛋白酶原A(PG-A)ELISA试剂盒 ，英文名： PG-A ELISA Kit

粘蛋白胭脂红shēng huà shì jì容量：5KU  Mouseniicoxide,NOELISA试剂盒小鼠(NO)ELISA试剂盒规格：96T/48T
小鼠肾足突细胞培养录本咪唑，英文名或英文缩写：Econazole nitnate，级别：BR，规格：100u  ELISAKitHSP-70猪热休克蛋白70规格：48T/96T

谷酸脱氢酶，牛肝　(-20℃)GLDH  Humaneosinophilchemotacticfactor，ECFELISAKit人鼠嗜酸粒细胞趋化因子(ECF)ELISA试剂盒规格：96T/48T

组双盐酸盐，英文名或英文缩写：Histamine dixy7nochloride，级别：BR，99%，规格：1克  人糖原化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

L-高脯酸 L-Pipecolic acid,99% 3105-95-1 50MG 通用试剂  猪白介素15(IL-15)免疫试剂盒 Pig Ierleukin 15,IL-15 ELISA Kit

草醋高铁铵 Fqrric cmmonium oxclctq trihydrctq 1368-4-3  HumanErythropoietieceptor,EPORELISAKit 人红细胞生成素受体(EPOR)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

运输和保存：
视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满*培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。