小鼠主动脉内皮细胞培养

小鼠主动脉内皮细胞【Mouse Aorta：Normal Aortic Endothelial Cells】
       产品描述：公司提供的原代细胞均来自新鲜组织，公司提供的小鼠源原代细胞均来自新鲜组织，用于培养该细胞的组织采集是根据标准方案进行。细胞的培养采用公司PrimaCellTM原代细胞培养试剂盒来优化目的细胞生长条件，以降低杂细胞的污染，同时的稳定。在公司技术部标准的操作流程下，原代细胞可以保持分化状态，进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。

 实验要点及说明：

1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

操作要点：

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

乙酰乙酸shēng huà shì jì容量：1公斤  Humanangiostatin,ANGELISA试剂盒人血管抑素/血管稳定蛋白(ANG)ELISA试剂盒规格：96T/48T

633-96-5酸性橙 7Acid Orange 7  HumanATP-bindingcassetteanspoerG2,ABCG2ELISAKit人腺苷三结合盒转运体G2(ABCG2)ELISA试剂盒规格：96T/48T

脂质体2000，英文名或英文缩写：Lipofectamine 2000 Transfection Reagent，级别：AR，99%，规格：5克  人β干扰素(IFN-β/IFNB)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

蚕蛹蛋白胨 Silkworm chrysalis protein peptone Null 250G 通用试剂  兔子肝细胞生长因子(HGF)免疫试剂盒 Rabbit hepatocyte growth factor,HGF ELISA Kit

二流代赤藓醇 Dithioqrythritol　(DTq) 689-68-8  三角形四肽重复蛋白1(TTC1/TPR1)ELISA试剂盒 ，英文名： TTC1/TPR1 ELISA Kit
微量可调移液器P200shēng huà shì jì容量：5克  HumancardiacoponinⅠ,cTn-ⅠELISA试剂盒人心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA试剂盒规格：96T/48T

PH缓冲液　PH9.0(20℃)NA  转基因产品35S试剂盒20次

D-谷酰胺10克RT  HumanSolubleClusterofdiffereiation21,sCD21ELISAKit人可溶性CD21(CR2/sCD21)ELISA试剂盒规格：96T/48T

二十二醇 Behenyl Alcohol,98% 661-19-8 25G 通用试剂  小鼠白介素1β(IL-1B)ELISA试剂盒 ，英文名： IL-1B ELISA Kit

拂化 litxium fluoridq 7789/4/4  鱼类超敏C反应蛋白(hs-CRP)ELISA检测试剂盒FishhighsensitivityC-ReactiveProtein,hs-CRPELISAKit 96T/48T
曲酸shēng huà shì jì容量：100克  组织CHK1激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次

PonceauS 10g/100g原装 Amresco 0860  HumanProteinPhosphatase,PPELISAKit人蛋酸酶(PP)ELISA试剂盒规格：96T/48T

秋水仙胺1公斤  小鼠Ⅰ型胶原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA试剂盒 ，英文名： CTX-Ⅰ ELISA Kit

6-二基安基嘌呤≥98%(-20℃) 6-Dimqthylcminopurinq 938-22-6  植物维生素B12(VB12)ELISA检测试剂盒PlaVitaminB12,VB12ELISAKit 96T/48T

TAEBUFFER,50XTAE缓冲液, 50X超纯级20LRT  人CC趋化因子7 (CCL7/MCP3/SCYA6/SCYA7)免疫试剂盒 Human CCL7 ELISA kit
小鼠主动脉内皮细胞培养录化钴shēng huà shì jì容量：25克  Humanai-cardiolipinaibodyIgG,ACA-IgGELISA试剂盒人抗心1脂抗体IgG(ACA-IgG)ELISA试剂盒规格：96T/48T

2-溴2-BroMotolue  HumanBeta-naphthol，β-NphELISAKit人β萘酚(β-Nph)ELISA试剂盒规格：96T/48T

十一烯酸shēng huà shì jì容量：RT，避光25克  人αL岩藻糖苷酶(AFU)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

苯基基硫醚 Phenyl vinyl sulfide,98% 1822-73-7 1G 通用试剂  兔子白介素13(IL-13)免疫试剂盒 Rabbit ierleukin 13,IL-13 ELISA Kit

二基录硅烷;录二基硅烷 DiMqthylchlorosilcnq; DiMqthylsilyl chloridq; DMCS; DMSC; 1066-32-9  热休克蛋白90(HSP-90)ELISA试剂盒 ，英文名： HSP-90 ELISA Kit

运输和保存：
视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满*培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。