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上海一研生物科技有限公司
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大鼠角膜组织提取物说明书

大鼠角膜组织提取物说明书
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大鼠角膜组织提取物说明书在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
  大鼠角膜组织提取物说明书的详细资料:

产品名称

大鼠角膜组织提取物说明书

英文名称

Eye: Normal Rat Corneal Derivatives

货号

EYX99470

大鼠角膜组织提取物【Eye: Normal Rat Corneal Derivatives

角膜组织是是位于眼球前壁的一层透明膜,为眼睛提供大部分屈光力。公司科技提供来自新鲜或冷冻大鼠角膜组织中高质量的总RNAPCR准备的第一条cDNA链,蛋白质及其亚组分。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆,表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。

总RNA制备:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。
cDNA制备:纯化后的总RNA来合成cDNA第一链,以50ul总反应体系进行逆转录,体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA,1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析,保证了产品的质量。
蛋白制备:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人关节软骨组织裂解液,离心去除组织碎片,通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度,组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF,-80度保存。

 

实验要点及说明;

1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

 

操作要点;

1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内完全解冻,使细胞能尽快通过易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。
6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

5×A-plus MasterMix 5×加A反应液   4-Acetylbiphenyl9214-乙酰基

5M 甜菜碱溶液 PCR   5×1ml 4-Acetamidophenol对乙酰氨基酚

BSA溶液 PCR   5×1ml 4-[2-[(3-Ethyl-methyl-oxo-pyrrolin-yl)carboxamido]ethyl]benzenesulfonamide11189

DMSO-PCR   5×1ml 4-[2-(2-Amino,7-dihydro-oxoH-pymol[2,3-d]pyrimodin-yl)ethyl]benzoic acid methyl ester155

dNTP mM   0.5ml4-[(4-Methylpiperazin-yl) methyl]benzoic acid dihydrochloride62619甲磺酸伊马替尼
Capecitabine 2',3'-diacetate  162204-20-8  中文名:  分子式:C19H26FN3O8  度:98.0%  关键词:    线粒体解偶联蛋白2   英文名称:   Mouse Mitochondrial Uncoupling Protein 2   规格:   48T/96T   英文缩写:   UCP2

Capecitabine  154361-50-9  中文名:卡培他滨  分子式:C15H22FN3O6  度:98.0%  关键词    小鼠细胞粘附分子-1   英文名称:   vascuiar endothelial cells adhesion molecule 1   规格:   48T/96T   英文缩写:   VCAM-1

Canrenone  976-71-6  中文名:坎利酮  分子式:C22H28O3  度:98.0%  关键词:    小鼠鸟酸脱羧酶   英文名称:   Mouse Ornithine Decarboxylase   规格:   48T/96T   英文缩写:   ODC

Candesartan methyl ester  139481-69-9  中文名:  分子式:C25H22N6O3  度:98.0%  关键词:    小鼠卵清蛋白特异性IgE   英文名称:   Mouse ovalbumin specific Immunoglobulin E   规格:   48T/96T   英文缩写:   OVA sIgE

Candesartan ethyl ester  139481-58-6  中文名:  分子式:C26H24N6O3  度:98.0%  关键词:    小鼠氧化低密度脂蛋白   英文名称:   Mouse oxidized Low Density Lipoprotein   规格:   48T/96T   英文缩写:   oxLDL
氯化飞燕草素,O二葡萄糖苷 HPLC95% 20mg RatCyclin-D2ELISAKit大鼠细胞周期素D2(Cyclin-D2)ELISA试剂盒规格:96T/48T

氯化失车菊素,O双葡萄糖苷 HPLC95% 20mg RatCyclin-D2ELISA试剂盒大鼠细胞周期素D2(Cyclin-D2)ELISA试剂盒规格:96T/48T

二氢葫芦素B HPLC95% 20mg RatCyclin-D3ELISAKit大鼠细胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISA试剂盒规格:96T/48T

葫芦素B OBetaD葡萄糖苷 HPLC95% 20mg RatCyclin-D3ELISA试剂盒大鼠细胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISA试剂盒规格:96T/48T

甲基新苦木素 HPLC95% 20mg RatCyclosporineA,CsAELISAKit大鼠环孢素A(CsA)ELISA试剂盒规格:96T/48T

,二去氢隐丹参酮 HPLC95% 20mg RatCyclosporineA,CsAELISA试剂盒大鼠环孢素A(CsA)ELISA试剂盒规格:96T/48T

丹参二醇A HPLC95% 20mg RatCystatinC,Cys-CELISAKit大鼠半胱氨酸蛋白酶抑制剂/胱抑素C(Cys-C)ELISA试剂盒规格:96T/48T

丹参二醇B HPLC95% 20mg RatCystatinC,Cys-CELISA试剂盒大鼠半胱氨酸蛋白酶抑制剂/胱抑素C(Cys-C)ELISA试剂盒规格:96T/48T

丹参二醇C HPLC95% 20mg RatCytochrome-C,Cyt-CELISAKit大鼠细胞色素C(Cyt-C)ELISA试剂盒规格:96T/48T

丹参酸甲酯 HPLC95% 20mg RatCytochrome-C,Cyt-CELISA试剂盒大鼠细胞色素C(Cyt-C)ELISA试剂盒规格:96T/48T
大鼠角膜组织提取物说明书线粒体呼吸链复合体Ⅲ活性测试盒   可见分光光度法   25/24  Aurantio-obtusin  67979-25-3  中文名:橙黄决明素  分子式:C17H14O7 

线粒体呼吸链复合体Ⅲ活性测试盒   可见分光光度法   25/24  4,4'-Dimethoxytrityl chloride  中文名:4,4'-二甲氧基三苯基氯甲烷  分子式:C21H19ClO2  度:98.0%

线粒体呼吸链复合体Ⅱ活性测试盒   可见分光光度法   25/24  Aurantio-obtusin  67979-25-3  中文名:橙黄决明素  分子式:C17H14O7  度:99.0%  关键词:  决明; 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库

线粒体呼吸链复合体Ⅱ活性测试盒   可见分光光度法   25/24  4,5,6,7-Tetrahydrothieno [3,2,c]pyridine hydrochloride  28783-41-7  中文名:  分子式:C7H10ClNS 

线粒体复合物V蛋白共沉淀分析试剂盒5  2,4-Dihydroxy-3-nitropyridine  89282-12-2  中文名:  分子式:C5H4N2O4  度:98.0%  关键词:

运输和保存;
视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。

 

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