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丙酸蛛网菌探针法荧光定量PCR试剂盒说明

丙酸蛛网菌探针法荧光定量PCR试剂盒说明
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产品型号:
50T .
产品报价:
产品特点:
丙酸蛛网菌探针法荧光定量PCR试剂盒说明是从土壤农杆菌 CP4 菌株中分离得到的抗除草剂草甘膦基因,是转基因植物研究中常用的一种筛选标记基因,因此本公司根据探针法 qPCR 原理开发了专门用于检测的试剂盒。
  50T .丙酸蛛网菌探针法荧光定量PCR试剂盒说明的详细资料:
产品名称英文名称货号
 丙酸蛛网菌探针法荧光定量PCR试剂盒说明  Arachnia propionica  EY-P6379

实时荧光定量PCR:
实时荧光定量PCR技术有效地解决了传统定量只能终点检测的局限,实现了每一轮循环均检测一次荧光信号的强度,并记录在电脑软件之中,通过对每个样品Ct值的计算,根据标准曲线获得定量结果。因此,实时荧光定量PCR无需内标是建立在两个基础之上的:
1)Ct值的重现性PCR循环在到达Ct值所在的循环数时,刚刚进入真正的指数扩增期(对数期),此时微小误差尚未放大,因此Ct值的重现性极好,即同一模板不同时间扩增或同一时间不同管内扩增,得到的Ct值是恒定的。
2)Ct值与起始模板的线性关系由于Ct值与起始模板的对数存在线性关系,可利用标准曲线对未知样品进行定量测定,因此,实时荧光定量PCR是一种采用外标准曲线定量的方法。
外标准曲线的定量方法相比内标法是一种准确的、值得信赖的科学方法。利用外标准曲线的实时荧光定量PCR是迄今为止定量最准确,重现性的定量方法,已得到全世界的公认,广泛用于基因表达研究、转基因研究,药物疗效考核、病原体检测等诸多领域。
荧光化学物质:
实时荧光定量PCR所使用的荧光物质可分为两种:荧光探针和荧光染料。现将其原理简述如下:
1. TaqMan荧光探针:PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,该探针为一寡核苷酸,两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;PCR扩增时,Taq酶的5'-3'外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。而新型TaqMan-MGB探针使该技术既可进行基因定量分析,又可分析基因突变(SNP),有望成为基因诊断和个体化用药分析的技术平台。
2. SYBR荧光染料:在PCR反应体系中,加入过量SYBR荧光染料,SYBR荧光染料非特异性地掺入DNA双链后,发射荧光信号,而不掺入链中的SYBR染料分子不会发射任何荧光信号,从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步。SYBR仅与双链DNA进行结合,因此可以通过溶解曲线,确定PCR反应是否特异。
3. 分子信标:是一种在5和3末端自身形成一个8个碱基左右的发夹结构的茎环双标记寡核苷酸探针,两端的核酸序列互补配对,导致荧光基团与淬灭基团紧紧靠近,不会产生荧光。PCR产物生成后,退火过程中,分子信标中间部分与特定DNA序列配对,荧光基因与淬灭基因分离产生荧光 。

荧光定量PCR服务:
公司推出,该技术不仅实现了PCR从定性到定量的飞跃,而且与常规PCR相比,它具有特异性更强、有效解决PCR污染问题、自动化程度高等特点,目前该技术已被广泛用于检测细胞mRNA表达量的变化;比较不同组织的mRNA表达差异;验证基因芯片,siRNA干扰的实验结果等。我公司为您提供全套实时荧光定量PCR技术服务,全部实验皆使用进口试剂完成,主要定量PCR仪器。
1、荧光定量PCR服务要求:
(01)请您提供新鲜的且尽量多的材料;或直接提供纯化好的总RNA(大于 5 ug/样品);或直接提供纯化好的DNA(大于 5 ug/样品)。
(02)请提供已知的全长基因序列。
(03)请提供尽可能详细的背景资料:DNA/RNA 来源等
2、荧光定量PCR操作程序
(01)引物(探针)设计与合成。
(02)提取DNA/RNA,样本逆转录成cDNA。
(03)进行Real Time PCR实验,进行实验结果分析。
(04)实验完成后,提供完整的实验报告(含软件分析结果)及引物等实验材料。
3、荧光定量PCR的收费标准:
  我公司根据客户的样品数量进行不同的收费标准。

几种传统荧光定量PCR方法简介:
1)内参照法:
在不同的PCR反应管中加入已定量的内标和引物,内标用基因工程方法合成。上游引物用荧光标记,下游引物不标记。在模板扩增的同时,内标也被扩增。在PCR产物中,由于内标与靶模板的长度不同,二者的扩增产物可用电泳或高效液相分离开来,分别测定其荧光强度,以内标为对照定量待检测模板。
2)竞争法:
选择由突变克隆产生的含有一个新内切位点的外源竞争性模板。在同一反应管中,待测样品与竞争模板用同一对引物同时扩增(其中一个引物为荧光标记)。扩增后用内切酶消化PCR产物,竞争性模板的产物被酶解为两个片段,而待测模板不被酶切,可通过电泳或高效液相将两种产物分开,分别测定荧光强度,根据已知模板推测未知模板的起始拷贝数。
丙酸蛛网菌探针法荧光定量PCR试剂盒说明3)PCR-ELISA法:
利用或生物素等标记引物,扩增产物被固相板上特异的探针所结合,再加入抗或生物素酶标抗体-辣根过氧化物酶结合物,最终酶使底物显色。常规的PCR-ELISA法只是定性实验,若加入内标,作出标准曲线,也可实现定量检测目的。

直接刚果红,英文名或英文缩写:Congo red,级别:超纯,99%,规格:250毫克  小鼠嗜酸粒细胞趋化因子(ECF)免疫试剂盒 Mouse eosinophil chemotactic factor,ECF ELISA Kit
6-FurfurylAminopurine 250mg/1g原装 Sigma K3378  玉米特定基因序列(IVR)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T
Dietxyladipate肥酸乙酯100克CP  Humacellreceptor,TCRELISA试剂盒人T细胞受体(TCR)ELISA试剂盒规格:96T/48T
碳醋铯 CqsiuM ccronctq 234-17-8  ELISAKitADRA1A小鼠能a1A受体规格:48T/96T
2-基1唑shēng huà shì jì容量:1公斤  HumanAspaateaminoansferase,ASTELISAKit人天门冬氨酸氨基转移酶(AST)ELISA试剂盒规格:96T/48T
羧甲基琼脂糖凝胶CL-6Bshēng huà shì jì容量:5克  Human5-Hydroxyyptamine,5HTELISAKit人5羟色胺(5-HT)ELISA试剂盒规格:96T/48T
(甲基吩嗪甲基盐,  人单核细胞趋化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
胶原酶25克  小鼠5羟色胺受体2A(5-H 2A)免疫试剂盒 Mouse 5-Hydroxyyptamine receptor 2A,5H 2A ELISA Kit
8-羌基-5-磺醋水合物 98% 8-xy7noXYinoneOLINq-5-SULFONIC cCID 07386-9-3  透明质酸酶(HAase)ELISA试剂盒 ,英文名: HAase ELISA Kit
MOPSOFREEACIDMOPSO超纯级25G68399-77-9RT  Mousepulmonaryactivatioegulatedchemokine,PARCELISA试剂盒小鼠肺部活化调节趋化因子(PARC/CCL18)ELISA试剂盒规格:96T/48T
1克RT  Humanbasicfibroblastgrowthfactor9,bFGF-9ELISAKit人碱性成纤维细胞生长因子9(bFGF-9)ELISA试剂盒规格:96T/48T
529-19-12-甲基本o-Tolunitnile  人α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
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正十二迷 DI-N-DODqCYL qtqr 424-27-8  Porcinethyroopin-releasinghormone,HELISA试剂盒猪促甲状腺素释放激素(H)ELISA试剂盒规格:96T/48T
甘露醇录化钠琼脂shēng huà shì jì容量:250克  HumanProteinZELISAKit人蛋白Z(ProteinZ)ELISA试剂盒规格:96T/48T
18698-97-02-溴2-Bromo  小鼠25-羟基维生素D3(HVD3)ELISA试剂盒 ,英文名: HVD3 ELISA Kit
精胺1毫克保存:-20℃  人双氢睾酮(DHT)ELISA检测试剂盒HumanDihydrotestosterone,DHTELISAKit 96T/48T
2,3-二轻 99% 2,3-Dixy7nofurcn 1191-99-7  大鼠凋亡相关因子(FAS)免疫试剂盒 Rat Factor-related Apoptosis,FAS ELISA Kit
己二酸5克RT  CLIAKitfoSH(HumahyroidStimulatingHormone)ELISAKit人促甲状腺素规格:48T/96T

 

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