人角膜上皮细胞培养

人角膜上皮细胞【Human Eyes: Normal Corneal Epithelial Cells】
       产品描述：公司提供的原代细胞均来自新鲜组织，公司提供的人源原代细胞均来自新鲜组织，用于培养该细胞的组织采集是根据标准方案进行。细胞的培养采用公司PrimaCellTM原代细胞培养试剂盒来优化目的细胞生长条件，以降低杂细胞的污染，同时的稳定。在公司技术部标准的操作流程下，原代细胞可以保持分化状态，进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。

 实验要点及说明：

1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

操作要点：

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

原钒酸钠100毫克保存：-20℃  英文名称Ratleucocyteaigen-B27ELISAKit大鼠白细胞抗原B27(HLA-B27)规格：96T/48T

Chymostatin 5mg原装 Amresco J584  酒类乙比色法定量检测试剂盒20次

四庚基溴化shēng huà shì jì容量：100克  ELISAKitHCG人绒毛膜促性腺激素规格：48T/96T

依来区普坦相关物质A clMotriptcn Rqlctqd CoMpound c;Mqthcnol 1018676-0-  小鼠白介素1受体拮抗剂(IL-1Ra)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

偶氮胭脂红B(老批号) cZOCcRMINq B 2360/7/9  Human sialic acid (SA) ELISA Kit 人唾液酸(SA)ELISA试剂盒
五肽胃泌素shēng huà shì jì容量：100克  人肝细胞生长因子(HGF)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

(PH标准液)  小鼠白介素10(IL-10)免疫试剂盒 Mouse ierleukin 10,IL-10 ELISA KIT

酪胺盐酸1公斤  纤维母细胞表面抗原(FSP)ELISA试剂盒 ，英文名： FSP ELISA Kit

醋 Bcrbituric ccid 1967/2/7  MouseIerleukin2,IL-2ELISA试剂盒小鼠白介素2(IL-2)ELISA试剂盒规格：96T/48T

AGAROSE3:1高分辨率琼脂糖生物技术级100G9012-36-6RT  ELISAKitMMP-5兔子基质金属蛋白酶5规格：48T/96T
三号胆盐5克RT，避光  赖氨酸羟化酶(lysylhydroxylase)活性高效液相色谱定量检测试剂盒20次

2-脱氧胞苷-5-三钠盐(+4℃)NA  ELISAKitCIAP人牛小肠碱性酶规格：48T/96T

金丝shēng huà shì jì容量：100克  小鼠W-3a蛋白(W3A)ELISA试剂盒 ，英文名： W3A ELISA Kit

2,4,4-三基-1-务烯;双异 2,4,4-TriMqthyl-1-pqntqnq 107-39-1  大鼠血小板活化因子(PAF)ELISA检测试剂盒Ratplateletactivatingfactor,PAFELISAKIT 96T/48T

脱氢乙酸shēng huà shì jì容量：500克  人H-钙粘着蛋白/H-钙粘连蛋白(H-Cad/CDH13)免疫试剂盒 Human E-Cadherin ELISA Kit
人角膜上皮细胞培养麦康凯琼脂培养基50克  HumanCarbohydrateaigen19-9,CA19-9ELISAKit人糖链抗原19-9(CA19-9)ELISA试剂盒规格：96T/48T

7790-84-3镉Cadmium sulfate octahydrate  人N端前脑素(-proBNP)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

微晶纤维素板1克2～8℃  兔诱导型合成酶(iNOS)免疫试剂盒 Rabbit inducible niic oxide syhase,iNOS ELISA KIT

苯硫醚 Diphenyl sulfide,98% 139-66-2 25G 通用试剂  清道夫受体B(SRB/CD36)ELISA试剂盒 ，英文名： SRB/CD36 ELISA Kit

醋洗矽藻土 DIcTOMcCqOUS qcRTH 68822-24-9  RabbitComplemefragme3a,C3aELISA试剂盒兔子补体片断3a(C3a)ELISA试剂盒规格：96T/48T

运输和保存：
视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满*培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。