大鼠肾足突基底膜组织提取物培养

大鼠肾足突基底膜组织提取物【Kidney: Normal Rat Kidney Foot Process Basement Membrane Derivatives】

肾足突基底膜是肾小球过滤膜的一部分，组成滤膜的中层。公司科技提供来自新鲜或冷冻大鼠肾足突基底膜组织中高质量的总RNA，PCR准备的第一条cDNA链，蛋白质及其亚组分。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆，表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。

总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。
cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA第一链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证了产品的质量。
蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人关节软骨组织裂解液，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。 

实验要点及说明；

1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

运输和保存；

视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满*培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。

操作要点；

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

6-TAMRA0mg2,4-Dihydroxy-nitropyridine892822

5(6)-TAMRA, SE0mg6-Amino,3-dimethyluracil66421

5-TAMRA, SE0mgMetoclopramide3642甲氧氯普胺

6-TAMRA, SE0mgAmiodarone hydrochloride197742盐酸胺酮

5(6)-ROX25mgZidovudine5167齐多夫定
Chloramphenicol  中文名：氯霉素  分子式：C11H12Cl2N2O5  度：98.0%  豚鼠降钙素基因相关肽(CGRP)ELISA试剂盒  

Ganciclovir  中文名：更昔洛韦  分子式：C9H13N5O4  度：98.0%  豚鼠基质金属蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA试剂盒  

Oxiracetam  中文名：奥拉西坦  分子式：C6H10N2O3  度：98.0%  豚鼠基质金属蛋白酶9(MMP-9)ELISA试剂盒           

Piracetam  中文名：吡拉西坦  分子式：C6H10N2O2  度：98.0%  豚鼠钩端螺旋体IgG(Lebtospira)ELISA试剂盒  

Fudosteine  中文名：福多斯坦  分子式：C6H13NO3S  度：98.0%  豚鼠肝细胞生长因子(HGF)ELISA试剂盒
毛地黄素 HPLC≥98% 20mg ELISAKitPL/Fbn人纤溶酶/纤维蛋白溶酶规格：48T/96T

毛萼结甲 HPLC≥98% 20mg ELISAKitPLAP人胎盘碱性0酸酶规格：48T/96T

毛钩藤碱 HPLC≥98% 10mg ELISAKitPLGA人纤溶酶原激活剂规格：48T/96T

毛果芸香碱 HPLC≥98% 20mg ELISAKitPLGF人胎盘生长因子规格：48T/96T

毛兰素 HPLC≥98% 20mg ELISAKitPlg人纤溶酶原规格：48T/96T

毛两面针素 HPLC≥98% 20mg ELISAKitPL人胎盘泌乳素规格：48T/96T

毛蕊异黄酮 HPLC≥98% 20mg ELISAKitPL人胰脂肪酶规格：48T/96T

毛蕊异黄酮苷 HPLC≥98% 20mg ELISAKitpMHC人肽-MHC复合物规格：48T/96T

茅苍术醇 HPLC≥98% 20mg ELISAKitPPAR-γ兔过氧化物酶体增殖因子活化受体γ规格：48T/96T

没食子儿茶素 HPLC≥98% 20mg ELISAKitPPI人肽基脯氨酰顺反异构酶规格：48T/96T
大鼠肾足突基底膜组织提取物培养微量样品DNA提取试剂盒   50T  Androst-2-en-17-one  中文名：5α-雄甾-2-烯-17-酮  分子式：C19H28O  度：98.0%

微量二（MDA）测定试剂盒（TBA法）  Polyhydroxybutyrate  26744-04-7  中文名：聚羟基丁酸酯  分子式：C12H20O7  度：%  关键词：  中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库

微量二（MDA）测定试剂盒（TBA法）  Androst-5-ene-3β,17β-diol 3,17-diacetate  2099-26-5  中文名：雄甾-5-烯-3β,17β-二醇 3,17-二乙酸酯  分子式：C23H34O4  度：98.0%  关键词： 

微量DNA凝胶回收试剂盒   50T  Androst-5-en-3-ol-7,17-dione acetate  1449-61-2  中文名：7-酮基去氢表雄酮醋酸酯  分子式：C21H28O4  度：98.0%  关键词： 

微晶纤维素   50g  Androst-2-en-17-one  963-75-7  中文名：5α-雄甾-2-烯-17-酮  分子式：C19H28O  度：98.0%  关键词：