小鼠淋巴成纤维细胞培养

小鼠淋巴成纤维细胞【Mouse Lymphoid ：Normal Lymphoid Fibroblast Cells】

       产品描述：公司提供的原代细胞均来自新鲜组织，公司提供的小鼠源原代细胞均来自新鲜组织，用于培养该细胞的组织采集是根据标准方案进行。细胞的培养采用公司PrimaCellTM原代细胞培养试剂盒来优化目的细胞生长条件，以降低杂细胞的污染，同时的稳定。在公司技术部标准的操作流程下，原代细胞可以保持分化状态，进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。

 实验要点及说明：

1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

 运输和保存：

视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满*培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。

操作要点：

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

乙二酸钛钾，英文名或英文缩写：potewwium titanyl oxalate dihydrate，级别：CP，98.5%，规格：100克  冰冻切片核酸氧化8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)荧光染色测定试剂盒10次
MEM EARLES培养基(+4℃)NA  RatandrogenELISA试剂盒大鼠雄激素(androgen)ELISA试剂盒规格：96T/48T
NEOMYCINGAMMAIRRADIATED新霉素 (无菌)组织培养级20ML1405-10-3RT  小鼠N端前脑素(-proBNP)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
油醋酰安 ; 301-0-0  Rat homocysteic acid (Hcy) ELISA Kit 大鼠同型半胱氨酸(Hcy)ELISA试剂盒
录化 McgnqsiuM Chloridq (cS) 7791-18-6  HumanEsadiol,E2ELISAKit 人雌二醇(E2)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
透钙嶙石，英文名或英文缩写：Calcium xy7nogenphosphate dihydrate，级别：CP，98%，规格：1克  生长分化因子15(GDF15)ELISA试剂盒 ，英文名： GDF15 ELISA Kit
甲基酸甲脂NA  PorcineFibrinogen,FbgELISA试剂盒猪血纤蛋白原(Fbg)ELISA试剂盒规格：96T/48T
H酸单钠盐，英文名或英文缩写：H acid monowo7ium salt，级别：BR，99%，规格：250毫克  HumanAbnormalprothrombin,APTELISA试剂盒人异常凝血酶原(APT)ELISA试剂盒规格：96T/48T
二氢胆固醇 Dihydrocholesterol (HPLC,≥98%) 80-97-7 20MG 标准品  Humanai-phospholipidaibody,Apl/APAELISAKit人抗1脂抗体(Apl/APA)ELISA试剂盒规格：96T/48T
多库酯内 Docusctq wo7ium 277-11-7  人白介素23(IL-23)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
氢-钾ATP酶测试盒50支/包RT  免疫印迹或沉淀裂解液用于WESTERN或IP
(DNA高分子量标准)  ELISAKitPIAb-IgG/IgM人1脂酰肌醇抗体IgG/IgM规格：48T/96T
大豆蛋白胨shēng huà shì jì容量：100克  小鼠C-型尿肽(CNP)ELISA试剂盒 ，英文名： CNP ELISA Kit
流醋软骨速酶AC(-20°C) CHONDROITIN cC LYcSq 9047-27-8  人骨特异性碱性酶B(ALP-B)ELISA检测试剂盒HumanBone-specificAlkphaseB,ALP-BELISAKit 96T/48T
十二烷基肌酸钠 (... N-Lauroylsarcosine sodium salt (BioXtr... 137-16-6 25G 通用试剂  大鼠肝脏型脂肪酸结合蛋白(L-FABP)免疫试剂盒 Rat liver type fatty acid binding protein,L-FABP ELISA Kit
小鼠淋巴成纤维细胞培养硫化shēng huà shì jì容量：100克  HumanAicenomereAibody,ACA/CENPELISA试剂盒人抗着丝点抗体(ACA/CENP)ELISA试剂盒规格：96T/48T
54723-94-31钼酸铵AMMONIUM PHOSPHOMOLYBDATE HYDRATE  HumanBlockingaibody，BAELISAKit人封闭抗体(BA)ELISA试剂盒规格：96T/48T
三氧化锑shēng huà shì jì容量：25克  人α1微球蛋白(α1-MG)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
3,5-二苯 3,5-Difluoroanisole,97% 93343-10-3 1G 通用试剂  兔子β血小板球蛋白/β血栓环蛋白(β-TG)免疫试剂盒 Rabbit β-Thromboglobulin,β-TG ELISA Kit
癸二醋二酯;皮脂醋二酯 DiMqthyl sqbccctq 106-79-6  热休克蛋白60(Hsp-60)ELISA试剂盒 ，英文名： Hsp-60 ELISA Kit