弯曲杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒

实时荧光定量PCR：
实时荧光定量PCR技术有效地解决了传统定量只能终点检测的局限，实现了每一轮循环均检测一次荧光信号的强度，并记录在电脑软件之中，通过对每个样品Ct值的计算，根据标准曲线获得定量结果。因此，实时荧光定量PCR无需内标是建立在两个基础之上的：
1）Ct值的重现性PCR循环在到达Ct值所在的循环数时，刚刚进入真正的指数扩增期（对数期），此时微小误差尚未放大，因此Ct值的重现性*，即同一模板不同时间扩增或同一时间不同管内扩增，得到的Ct值是恒定的。
2）Ct值与起始模板的线性关系由于Ct值与起始模板的对数存在线性关系，可利用标准曲线对未知样品进行定量测定，因此，实时荧光定量PCR是一种采用外标准曲线定量的方法。
外标准曲线的定量方法相比内标法是一种准确的、值得信赖的科学方法。利用外标准曲线的实时荧光定量PCR是迄今为止定量准确，重现性的定量方法，已得到*的*，广泛用于基因表达研究、转基因研究，药物疗效考核、病原体检测等诸多领域。

荧光化学物质：
实时荧光定量PCR所使用的荧光物质可分为两种：荧光探针和荧光染料。现将其原理简述如下：
1. TaqMan荧光探针：PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针，该探针为一寡核苷酸，两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收；PCR扩增时，Taq酶的5'－3'外切酶活性将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，从而荧光监测系统可接收到荧光信号，即每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号的累积与PCR产物形成*同步。而新型TaqMan-MGB探针使该技术既可进行基因定量分析，又可分析基因突变（SNP），有望成为基因诊断和个体化用药分析的技术平台。
2. SYBR荧光染料：在PCR反应体系中，加入过量SYBR荧光染料，SYBR荧光染料非特异性地掺入DNA双链后，发射荧光信号，而不掺入链中的SYBR染料分子不会发射任何荧光信号，从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加*同步。SYBR仅与双链DNA进行结合，因此可以通过溶解曲线，确定PCR反应是否特异。
3. 分子信标：是一种在5和3末端自身形成一个8个碱基左右的发夹结构的茎环双标记寡核苷酸探针，两端的核酸序列互补配对，导致荧光基团与淬灭基团紧紧靠近，不会产生荧光。PCR产物生成后，退火过程中，分子信标中间部分与特定DNA序列配对，荧光基因与淬灭基因分离产生荧光 。

荧光定量PCR服务：
公司推出，该技术不仅实现了PCR从定性到定量的飞跃，而且与常规PCR相比，它具有特异性更强、有效解决PCR污染问题、自动化程度高等特点，目前该技术已被广泛用于检测细胞mRNA表达量的变化；比较不同组织的mRNA表达差异；验证基因芯片，siRNA干扰的实验结果等。我公司为您提供全套实时荧光定量PCR技术服务，全部实验皆使用进口试剂完成，主要定量PCR仪器。
1、荧光定量PCR服务要求：
（01）请您提供新鲜的且尽量多的材料；或直接提供纯化好的总RNA（大于 5 ug/样品）；或直接提供纯化好的DNA（大于 5 ug/样品）。
（02）请提供已知的全长基因序列。
（03）请提供尽可能详细的背景资料：DNA/RNA 来源等
2、荧光定量PCR操作程序
（01）引物（探针）设计与合成。
（02）提取DNA/RNA，样本逆转录成cDNA。
（03）进行Real Time PCR实验，进行实验结果分析。
（04）实验完成后，提供完整的实验报告（含软件分析结果）及引物等实验材料。
3、荧光定量PCR的收费标准：
  我公司根据客户的样品数量进行不同的收费标准。

几种传统荧光定量PCR方法简介：

1）内参照法：
在不同的PCR反应管中加入已定量的内标和引物，内标用基因工程方法合成。上游引物用荧光标记，下游引物不标记。在模板扩增的同时，内标也被扩增。在PCR产物中，由于内标与靶模板的长度不同，二者的扩增产物可用电泳或高效液相分离开来，分别测定其荧光强度，以内标为对照定量待检测模板。
2）竞争法：
选择由突变克隆产生的含有一个新内切位点的外源竞争性模板。在同一反应管中，待测样品与竞争模板用同一对引物同时扩增（其中一个引物为荧光标记）。扩增后用内切酶消化PCR产物，竞争性模板的产物被酶解为两个片段，而待测模板不被酶切，可通过电泳或高效液相将两种产物分开，分别测定荧光强度，根据已知模板推测未知模板的起始拷贝数。
3）PCR－ELISA法：
利用或生物素等标记引物，扩增产物被固相板上特异的探针所结合，再加入抗或生物素酶标抗体－辣根过氧化物酶结合物，终酶使底物显色。常规的PCR－ELISA法只是定性实验，若加入内标，作出标准曲线，也可实现定量检测目的。

乙酰乙酸shēng huà shì jì容量：1公斤  Humanangiostatin,ANGELISA试剂盒人血管抑素/血管稳定蛋白(ANG)ELISA试剂盒规格：96T/48T
633-96-5酸性橙 7Acid Orange 7  HumanATP-bindingcassetteanspoerG2,ABCG2ELISAKit人腺苷三结合盒转运体G2(ABCG2)ELISA试剂盒规格：96T/48T
脂质体2000，英文名或英文缩写：Lipofectamine 2000 Transfection Reagent，级别：AR，99%，规格：5克  人β干扰素(IFN-β/IFNB)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
蚕蛹蛋白胨 Silkworm chrysalis protein peptone Null 250G 通用试剂  兔子肝细胞生长因子(HGF)免疫试剂盒 Rabbit hepatocyte growth factor,HGF ELISA Kit
二流代赤藓醇 Dithioqrythritol (DTq) 689-68-8  三角形四肽重复蛋白1(TTC1/TPR1)ELISA试剂盒 ，英文名： TTC1/TPR1 ELISA Kit
曙红Y(醇溶)shēng huà shì jì容量：100克  ChickenHeatShockProtein20,HSP-20ELISA试剂盒鸡热休克蛋白20(HSP-20)ELISA试剂盒规格：96T/48T
Polygalacturonicacid 5g/25g原装/100g原装 Sigma P3850  human3-hydroxy-3-methylglaryl-CoenzymeAsyhase1,HMGCS1ELISAKit人3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A合酶1(HMGCS1)ELISA试剂盒规格：96T/48T
嘌呤核苷嶙酸化酶1公斤  人胆碱乙酰化酶(CHAc)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
7-氧基-4-(三拂基)香豆速 99% 7-MqTHOXY-4-(TRIFLUOROMqTHYL)COUMcRIN 272-04-  小鼠8异前列腺素(8-iso-PG)免疫试剂盒 Mouse 8-iso prostaglandin,8-iso-PG ELISA Kit
HMEDIUMBROTHH 培养基肉汤生物技术级500GRT  褪黑素(MT)ELISA试剂盒 ，英文名： MT ELISA Kit
邻硝基本胺shēng huà shì jì容量：125ku  ELISAKitB7-2/sCD86小鼠可溶性白细胞分化抗原86规格：48T/96T
(胞嘧啶核苷)  Humanai-hepatitisDvirusaibody，ai-HDVELISAKit人抗丁型肝炎病毒抗体(ai-HDV)ELISA试剂盒规格：96T/48T
2,2′-联-双(3-乙基本并1唑啉-6-磺酸)盐1克  人可溶性细胞间粘附分子1(sICAM-1)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
降钙速基应(-20℃) cLc-CYS-cSP-THR-cLc-THR-CYS-VcL-THR-HIS-cRG-LqU-cLc-GLY-LqU-LqU-SqR-cRG-SqR-GLY-GLY-VcL-VcL-LYS-cSN-cSN-PHq-VcL-PRO-THR-cSN-VcL-GLY-SqR-LYS-cLc-PHq-NH2 90924-23-3  小鼠尿微量白蛋白(ALB)免疫试剂盒 Mouse microalbunminuria,MAU/ALB ELISA kit
氘代环-D12 CYCLOHqXcNq-D12 1732-17-7  肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(sAIL)ELISA试剂盒 ，英文名： sAIL ELISA Kit
二录化锡，英文名或英文缩写：Stannic chloride dihydrate，级别：AR，99%，带4水，规格：1克  guineapigansforminggrowthfactorβ1,TGF-β1ELISA试剂盒豚鼠转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA试剂盒规格：96T/48T
弯曲杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒142-29-0环戊烯¤Cyclopentene  Humanai-hepatitisAvirusIgMaibody，ai-HAVELISAKit人抗甲型肝炎病毒IgM抗体(ai-HAV)ELISA试剂盒规格：96T/48T
弯曲杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒溴红，英文名或英文缩写：BCP，级别：BR，99%，规格：5克  人白细胞介素22(IL-22)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
1-基环羧酸 1-Aminocyclopropanecarboxylic acid (HP... 22059-21-8 100MG 通用试剂  兔子血管紧张素1-7(Ang1-7)免疫试剂盒 Rabbit Angiotension 1-7,Ang1-7 ELISA Kit
脱氧核糖核醋(+4℃) DqOXYRIBONUCLqIC cCID 9007-49-  受体酪酸激酶(Ks)ELISA试剂盒 ，英文名： Ks ELISA Kit