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上海一研生物科技有限公司
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猫支原体探针法荧光定量PCR试剂盒说明

猫支原体探针法荧光定量PCR试剂盒说明
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产品型号:
50T
产品报价:
产品特点:
猫支原体探针法荧光定量PCR试剂盒说明是从土壤农杆菌 CP4 菌株中分离得到的抗除草剂草甘膦基因,是转基因植物研究中常用的一种筛选标记基因,因此本公司根据探针法 qPCR 原理开发了专门用于检测的试剂盒。
  50T猫支原体探针法荧光定量PCR试剂盒说明的详细资料:

产品名称

英文名称

货号

猫支原体探针法荧光定量PCR试剂盒说明

Mycoplasma felis

EY-P6974

实时荧光定量PCR:

实时荧光定量PCR技术有效地解决了传统定量只能终点检测的局限,实现了每一轮循环均检测一次荧光信号的强度,并记录在电脑软件之中,通过对每个样品Ct值的计算,根据标准曲线获得定量结果。因此,实时荧光定量PCR无需内标是建立在两个基础之上的:
1)Ct值的重现性PCR循环在到达Ct值所在的循环数时,刚刚进入真正的指数扩增期(对数期),此时微小误差尚未放大,因此Ct值的重现性极好,即同一模板不同时间扩增或同一时间不同管内扩增,得到的Ct值是恒定的。
2)Ct值与起始模板的线性关系由于Ct值与起始模板的对数存在线性关系,可利用标准曲线对未知样品进行定量测定,因此,实时荧光定量PCR是一种采用外标准曲线定量的方法。
外标准曲线的定量方法相比内标法是一种准确的、值得信赖的科学方法。利用外标准曲线的实时荧光定量PCR是迄今为止定量准确,重现性的定量方法,已得到*的公认,广泛用于基因表达研究、转基因研究,药物疗效考核、病原体检测等诸多领域。
荧光化学物质:
实时荧光定量PCR所使用的荧光物质可分为两种:荧光探针和荧光染料。现将其原理简述如下:
1. TaqMan荧光探针:PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,该探针为一寡核苷酸,两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;PCR扩增时,Taq酶的5'-3'外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。而新型TaqMan-MGB探针使该技术既可进行基因定量分析,又可分析基因突变(SNP),有望成为基因诊断和个体化用药分析的技术平台。
2. SYBR荧光染料:在PCR反应体系中,加入过量SYBR荧光染料,SYBR荧光染料非特异性地掺入DNA双链后,发射荧光信号,而不掺入链中的SYBR染料分子不会发射任何荧光信号,从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步。SYBR仅与双链DNA进行结合,因此可以通过溶解曲线,确定PCR反应是否特异。
3. 分子信标:是一种在5和3末端自身形成一个8个碱基左右的发夹结构的茎环双标记寡核苷酸探针,两端的核酸序列互补配对,导致荧光基团与淬灭基团紧紧靠近,不会产生荧光。PCR产物生成后,退火过程中,分子信标中间部分与特定DNA序列配对,荧光基因与淬灭基因分离产生荧光 。

荧光定量PCR服务:
公司推出,该技术不仅实现了PCR从定性到定量的飞跃,而且与常规PCR相比,它具有特异性更强、有效解决PCR污染问题、自动化程度高等特点,目前该技术已被广泛用于检测细胞mRNA表达量的变化;比较不同组织的mRNA表达差异;验证基因芯片,siRNA干扰的实验结果等。我公司为您提供全套实时荧光定量PCR技术服务,全部实验皆使用进口试剂完成,主要定量PCR仪器。
1、荧光定量PCR服务要求:
(01)请您提供新鲜的且尽量多的材料;或直接提供纯化好的总RNA(大于 5 ug/样品);或直接提供纯化好的DNA(大于 5 ug/样品)。
(02)请提供已知的全长基因序列。
(03)请提供尽可能详细的背景资料:DNA/RNA 来源等
2、荧光定量PCR操作程序
(01)引物(探针)设计与合成。
(02)提取DNA/RNA,样本逆转录成cDNA。
(03)进行Real Time PCR实验,进行实验结果分析。
(04)实验完成后,提供完整的实验报告(含软件分析结果)及引物等实验材料。
3、荧光定量PCR的收费标准:
  我公司根据客户的样品数量进行不同的收费标准。

吐温65100  人癌标志物-CA153ELISAKit人癌标志物-CA153ELISAKit48T/96T人癌标志物-CA153ELISAKit48T/96T规格:48T/96T

94-75-72,4-二录本氧基乙酸2,4-Dichloropxenoxyacetic acid  小鼠白介素3(IL-3)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

盐培养基shēng huà shì jì容量:100  Human dehydroepiandrosterone sulfate (DHEA-S) ELISA Kit 人脱氢表雄酮酯(DHEA-S)ELISA试剂盒

2-溴代酰安 2-BROMOcCqTcMIDq 683-27-8  Humanglucokinase,GCKELISAKit 人葡萄糖激酶(GCK)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

扶化铝钾,英文名或英文缩写:potewwium fluoaluminate,级别:BR97%,规格:100  HumanCampylobacterJejuniPEB1ELISA试剂盒人空肠弯曲菌黏附蛋白(PEB1)ELISA试剂盒规格:96T/48T
木瓜蛋白酶shēng huà shì jì容量:25  Humanai-albuminaibody,AAAELISA试剂盒人抗白蛋白抗体(AAA)ELISA试剂盒规格:96T/48T

2411-89-4邻酞络合剂o-Cresolphthalein Complexone  HumanbasicfibroblastgrowthfactorbFGFELISAKit人碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)ELISA试剂盒规格:96T/48T

缩二脲shēng huà shì jì容量:RT25  人α-内肽(α-EP)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

环丙基苯硫醚 Cyclopropyl phenyl sulfide,99% 14633-54-6 1G 通用试剂  兔子白介素9(IL-9)免疫试剂盒 Rabbit Ierleukin 9,IL-9 ELISA Kit

邻本二加醋二正务酯;邻酞醋二正务酯 Di-n-cMyl phthclctq 131-18-0  绒毛膜促性腺激素β(β-CG)ELISA试剂盒 ,英文名: β-CG ELISA Kit
硅钨酸1028℃,避光  HumanPlacealalkalinepkosphatase,PLAPELISAKit 人胎盘碱性酶(PLAP)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

Cytidine 5g/10g/25g/50g Amresco 0182  Humanchondroitinsulfate,CSELISA试剂盒人软骨素(CS)ELISA试剂盒规格:96T/48T

免疫血清兔抗人IgGshēng huà shì jì容量:250  总乳酸待测样品处理试剂盒20

啊利新蓝8GS cLCIcN BLUq 8GX 1633-92-3  HumanSc1-70Aibody,Sc1-70-AbELISAKit人抗Sc1-70抗体(Sc1-70-Ab)ELISA试剂盒规格:96T/48T

3-环己基炳醋 Cyclohqxcnqpropionic ccid 701-97-3  小鼠α甘露糖苷酶(α Manase)ELISA试剂盒 ,英文名: α Manase ELISA Kit
猫支原体探针法荧光定量PCR试剂盒说明YPDBROTHYPD 肉汤生物技术级浅米黄色粉末RTsigma  MouseIerferonα,IFN-αELISA试剂盒小鼠α干扰素(IFN-α)ELISA试剂盒规格:96T/48T

(牛血红蛋白)  ELISAKitsCD40L兔子可溶性白细胞分化抗原40配体规格:48T/96T

StaurosporinefromStreptomycessp.链霉菌属十字孢碱10USP级,99%  ChickenIerleukin2,IL-2ELISAKit鸡白介素2(IL-2)ELISA试剂盒规格:96T/48T

苊醌;并二同;嵌务二同 ccqncphthqnqinoneonq;1,2-ccqncphthqnqdionq 8-86-0  人高迁移率族蛋白B1(HMGB-1) ELISA试剂盒 96T 试剂盒 组装/原装

甲叉双酰胺 (... N,N-Methyleisacrylamide (99.5%) 110-26-9 25G 分离试剂  小鼠白介素1β(IL-1β)免疫试剂盒 Mouse Ierleukin 1β,IL-1β ELISA Kit

几种传统荧光定量PCR方法简介:

1)内参照法:
在不同的PCR反应管中加入已定量的内标和引物,内标用基因工程方法合成。上游引物用荧光标记,下游引物不标记。在模板扩增的同时,内标也被扩增。在PCR产物中,由于内标与靶模板的长度不同,二者的扩增产物可用电泳或高效液相分离开来,分别测定其荧光强度,以内标为对照定量待检测模板。
2)竞争法:
选择由突变克隆产生的含有一个新内切位点的外源竞争性模板。在同一反应管中,待测样品与竞争模板用同一对引物同时扩增(其中一个引物为荧光标记)。扩增后用内切酶消化PCR产物,竞争性模板的产物被酶解为两个片段,而待测模板不被酶切,可通过电泳或高效液相将两种产物分开,分别测定荧光强度,根据已知模板推测未知模板的起始拷贝数。
3)PCR-ELISA法:
利用或生物素等标记引物,扩增产物被固相板上特异的探针所结合,再加入抗或生物素酶标抗体-辣根过氧化物酶结合物,终酶使底物显色。常规的PCR-ELISA法只是定性实验,若加入内标,作出标准曲线,也可实现定量检测目的。

 

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