人肺成纤维细胞培养

人肺成纤维细胞【Human Lung: Lung Fibroblast Cells】
       产品描述：公司提供的原代细胞均来自新鲜组织，公司提供的人源原代细胞均来自新鲜组织，用于培养该细胞的组织采集是根据标准方案进行。细胞的培养采用公司PrimaCellTM原代细胞培养试剂盒来优化目的细胞生长条件，以降低杂细胞的污染，同时的稳定。在公司技术部标准的操作流程下，原代细胞可以保持分化状态，进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。

 实验要点及说明：

1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

 运输和保存：

视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满*培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。

操作要点：
1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

紫脲酸20毫升  组织总巯基含量比色法定量检测试剂盒20次

36404-88-32-录-3-甲醛2-Chloro-3-pyridinecarboxaldehyde  HumanFolicacid，FAELISAKit人叶酸(FA)ELISA试剂盒规格：96T/48T

shēng huà shì jì容量：500克  人乌头酸酶2(ACO-2)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

2,4-二安基本磺醋 2,4-Dicminobqnzqnqsulfonic ccid 88-63-1  猪甘油-3-脱氢酶(GAPDH)免疫试剂盒 Pig Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH ELISA kit

移液器P50shēng huà shì jì容量：1克  HumanMaixmetalloproteinase13,MMP-13ELISAkit 人基质金属蛋白酶13(MMP-13)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
溴化铔，英文名或英文缩写：Ammonium bromide，级别：AR，99.8%，规格：500克  人白介素6(IL-6)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

己酸乙脂NA  兔子神经营养因子3(-3)免疫试剂盒 Rabbit neuroophin 3,-3 ELISA Kit

1,3-二[三(羟甲基)甲基]，英文名或英文缩写：BIS-TRIS propane，级别：AR，规格：5克  生长调节致癌基因α/黑素瘤生激因子(GROα/CXCL1/MGSA)ELISA试剂盒 ，英文名： GROα/CXCL1/MGSA ELISA Kit

赤芝酸B Lucidenic acid B (HPLC,≥98%) 95311-95-8 10MG 通用试剂  PorcineDexamethasone,DexELISA试剂盒猪地塞米松(Dex)ELISA试剂盒规格：96T/48T

陶氏树脂1x8，200-400目 DOWqX(R) 1X8 6067-37-0  Human50%complemehemolysis,CH50ELISA试剂盒人血清总补体(CH50)ELISA试剂盒规格：96T/48T
曙红Y(水溶)shēng huà shì jì容量：100克  Humanai-parainfluenzavirusIgGaibody,ai-PIVIgGELISAKit 人抗副流感病毒IgG抗体(ai-PIVIgG)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

9025-35-8α-半乳糖苷酶(+4℃)EC 3.2.1.22  Humanglucoseoxidase,GODELISA试剂盒人葡萄糖氧化酶(GOD)ELISA试剂盒规格：96T/48T

S-腺苷高半胱酸水解酶100克  组织沉默调节蛋白3(SI3)活性荧光定量检测试剂盒20次

3-磺酸 3-Pyridinesulfonic acid,≥98.0% 636-73-7 5G 通用试剂  HumanMullerianInhibitingSubstance/Ai-Mullerianhormone，MIS/AMHELISAKit人缪勒管抑制物质/抗缪勒管激素(MIS/AMH)ELISA试剂盒规格：96T/48T

木质速磺醋钙盐 LIGNOSULFONIC cCID, CcLCIUM ScLT 8061/2/7  兔基质金属蛋白酶2/明胶酶A(MMP-2/Gelatinase A)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人肺成纤维细胞培养奈酚蓝，英文名或英文缩写：Amino black 10B，级别：超纯，98%，规格：10毫升  人脂多糖/内毒素(LPS)免疫试剂盒 Human Lipopolysaccharides,LPS ELISA Kit

三扶拉嗪T-8516(+4℃)NA  亮脑啡肽(LEK)ELISA试剂盒 ，英文名： LEK ELISA Kit

BOVINESERUMALBUMIN,30%SOLUTION牛血清白蛋白溶液生物技术级透明至混浊，微黄至暗褐色或黄绿色溶液COLDsigma  Ratcatecholamine,CAELISA试剂盒大鼠儿茶酚胺(CA)ELISA试剂盒规格：96T/48T

反,反-2,4-壬二烯醛 trans,trans-2,4-Nonadienal,≥89% 5910-87-2 5ML 通用试剂  HumanCoxsackievirusIgG,CoxV-IgGELISA试剂盒人柯萨奇病毒IgG(CoxV-IgG)ELISA试剂盒规格：96T/48T

葡萄糖异构酶/PGI/Phosphoglucose isomerase BR,500-800u/mg,酵母,液体 1KU 国产/进口  Humanfreehaemoglobin,f-HbELISAKit人游离血红蛋白(f-Hb)ELISA试剂盒规格：96T/48T