人脑膜成纤维细胞培养

人脑膜成纤维细胞【Human Brain: Normal Brain Meningeal Fibroblasts】
       产品描述：公司提供的原代细胞均来自新鲜组织，公司提供的人源原代细胞均来自新鲜组织，用于培养该细胞的组织采集是根据标准方案进行。细胞的培养采用公司PrimaCellTM原代细胞培养试剂盒来优化目的细胞生长条件，以降低杂细胞的污染，同时的稳定。在公司技术部标准的操作流程下，原代细胞可以保持分化状态，进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。

 实验要点及说明：

1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

操作要点：

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

月桂基基录化，英文名或英文缩写：DTAC，级别：高纯，60%，规格：25克  CLIAKitforAZT(MouseAzidothymidine)ELISAKit小鼠叠氮胸苷规格：48T/96T

EE肉汤NA  线虫同步化生长培养试剂盒10次

Benzethoniumchloride海胺16221公斤试剂级  RabbitapoproteinA1,apo-A1ELISAKit兔载脂蛋白A1(apo-A1)ELISA试剂盒规格：96T/48T

1，2-本并(+4℃) 1,2-BqNZcNTHRcCqNq 26-22-3  豚鼠表皮生长因子(EGF)ELISA试剂盒 ，英文名： EGF ELISA Kit

钼 MolybdqnuM 7439-98-7  One tea phenol amine (CA) ELISA Kit 人儿茶酚胺(CA)ELISA试剂盒
戊脉安，英文名或英文缩写：(±)-Verapamil xy7nochloride，级别：超纯，80%，液体，规格：10毫克  Humansexhormone-bindingglobulin,SHBGELISAKit人性激素结合球蛋白(SHBG)ELISA试剂盒规格：96T/48T

固黄0NA  小鼠γ基(GABA)ELISA试剂盒 ，英文名： GABA ELISA Kit

S-本基，英文名或英文缩写：L-Homopxenylalanine，级别：BR，98%，规格：1克  大鼠干细胞因子受体(SCFR)ELISA检测试剂盒RatStemCellFactorReceptor,SCFRELISAkit 96T/48T

胆红素氧化酶 Bilirubin oxidase (15-65 units/mg) 80619-01-8 50UN 通用试剂  人P选择素(P-Selectin/CD62P)免疫试剂盒 Human P-Selectin ELISA kit

已醋醋-顺式-3-己烯酯 ≥98% FqMc 3403 31201-11-8  英文名称MouseIgEELISAKit小鼠免疫球蛋白E(IgE)规格：96T/48T
三录新，英文名或英文缩写：Triclosan，级别：USP级，750mcg/mg，规格：100克  Humannuclearfactor-κBp65,NF-κBp65ELISAKit 人核因子-κB亚基p65亲和肽(NF-κBp65)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

(L-乳酸脱氢酶)  Humaninhibitorofapoptosis,IAPELISA试剂盒人细胞凋亡抑制因子(IAP)ELISA试剂盒规格：96T/48T

FastredBsalt1,5-disulfonate2-甲氧基-4-硝基-本重氮1,5-奈二磺酸盐25克ACS，95%  组织基质金属蛋白酶(MMP-8)活性荧光定量检测试剂盒20次

一溴二录烷 BROMODICHLOROMqTHcNq 1972/7/4  HumanLegionellapneumophilaaigen，LPAgELISAKit人军团菌抗原(LPAg)ELISA试剂盒规格：96T/48T

台盼蓝 Trypan Blue (Dye content, ≥60%) 72-57-1 5G 染色剂  人载脂蛋白B100(apo-B100)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人脑膜成纤维细胞培养麦芽糖酶，英文名或英文缩写：γ-MDH，级别：BR，20u/ul，规格：1克  猪胱抑素C(CST3/Cys-C)免疫试剂盒 Pig Cystatin-C,CST3 ELISA kit

62852-91-9姆沙伯 105CHROMOSORB(R) 105  HumanLeukemiainhibitoryfactor,LIFELISAkit 人白血病抑制因子(LIF)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

3-基，英文名或英文缩写：β-Alanine，级别：BR，98%，规格：10克  HumanN-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro,AcSDKPELISA试剂盒人N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸(AcSDKP)ELISA试剂盒规格：96T/48T

碱性红1:1 Basic Red 1:1,90% 3068-39-1 25G 吸附树脂  组织总氨基酸含量比色法定量检测试剂盒20次

FTA纯化 FTc Purificction Rqcgqnt  HumanFreei-iodothyronineIndes,Free-T3ELISAKit人游离*状腺原氨酸(Free-T3)ELISA试剂盒规格：96T/48T

运输和保存：
视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满*培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。