小鼠表皮角质形成细胞培养

小鼠表皮角质形成细胞【Mouse Skin: Normal Epidermal Keratinocytes】
       产品描述：公司提供的原代细胞均来自新鲜组织，公司提供的小鼠源原代细胞均来自新鲜组织，用于培养该细胞的组织采集是根据标准方案进行。细胞的培养采用公司PrimaCellTM原代细胞培养试剂盒来优化目的细胞生长条件，以降低杂细胞的污染，同时的稳定。在公司部标准的操作流程下，原代细胞可以保持分化状态，进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。

我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌；部分产品现货，超低比价，产品名称货期短，价格优，售后齐全。

细胞培养方法：
1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；
③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；
⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）
②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；
④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

实验事项：

1. 试剂准备：所有试剂都必须在使用前达到室温，使用后请立即按照说明书要求保存试剂。  实验操作中请使用一次性的吸头，避免交叉污染。
2.   加样：加样或加试剂时，请注意在吸取标本 / 标准品，酶结合物或底物时，前一个孔与后一个孔加样之间的时间间隔如果太大，将会导致不同的“预孵育"时间，从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。一次加样时间(包括标准品及所有样品)好控制在10分钟内，如标本数量多，推荐使用多道移液器加样。
3.   孵育：为防止样品蒸发，试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内，酶标板加上盖或覆膜，以避免液体蒸发；洗板后应尽快进行下步操作，任何时侯都应避免酶标板处于干燥状态;同时应严格遵守给定的孵育时间和温度。
4.   洗涤：洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干，勿将滤纸直接放入反应孔中吸水，同时要消除板底残留的液体和手指印，避免影响后的酶标仪读数。
5.  试剂配制：Detection A及Detection B在使用前请手甩几下或少时离心处理，以使管壁或瓶盖的液体沉积到管底。标准品、检测溶液A工作液、检测溶液B工作液请依据所需的量配置使用，并使用相应的稀释液配制，不能混淆。请确配置标准品及工作液，尽量不要微量配置(如吸取检测溶液A时，一次不要小于10μl)，以避免由于不准确稀释而造成的浓度误差；请勿重复使用已稀释过的标准品、检测溶液A工作液或检测溶液B工作液。
6.  反应时间的控制：加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化(比如，每隔10分钟)，如颜色较深，请提前加入终止液终止反应，避免反应过强从而影响酶标仪光密度读数。
7.  底物：底物请避光保存，在储存和温育时避免强光直接照射。
    建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。
    如标本中待测物质含量过高，请先稀释后再测定，计算时请后乘以稀释倍数。

注意事项：

1. 接收到，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张）。
2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。
3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。
6.1000rpm，5min离心，重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。 

依来蓝R，英文名或英文缩写：Eriochrome blue black R，级别：100s/盒，规格：500克  人胰高血糖素(GC)免疫试剂盒 Human Glucagon,GC ELISA Kit

16029-98-4三硅烷Iodotrimetxylsilane  人抗心1脂抗体IgG(ACA-IgG)ELISA试剂盒 ，英文名： ACA-IgG ELISA Kit

AMMONIUMSULFATE胺蛋白组学级白色结晶粉末RTsigma  Ratgalanin,GALELISA试剂盒大鼠甘肽/甘素(GAL)ELISA试剂盒规格：96T/48T

羟基香茅醛 Hydroxycitronellal,≥95% 107-75-5 5ML 通用试剂  Humanepidemicparotitis,EPELISA试剂盒人流行性腮腺炎(EP)ELISA试剂盒规格：96T/48T

二酯酶Ⅱ/二脂酶/二酯酶/Phosphodiesterase II from bovine spleen BR，10u/mg 10U 国产/进口  HumanHexokinase,HKELISAKit人己糖激酶(HK)ELISA试剂盒规格：96T/48T
糖化血清蛋白测试盒(果糖胺法，带标准)shēng huà shì jì容量：1000支/包  猪激动异构酶/细胞分裂素MB(CKMB)免疫试剂盒 Pig cytokinin MB,CKMB ELISA Kit

52950-18-2R-(-)-2-录扁桃酸(R)-(-)-2-Chloromandelic acid  HumanNeuroophin-3,-3ELISAKIT 人神经营养因子3(-3)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

三本甲基录树脂5克RT  Humanmucosaladdressincelladhesionmolecule-1,MAdCAM-1ELISA试剂盒人黏膜地址素细胞黏附分子(MAdCAM-1)ELISA试剂盒规格：96T/48T

虾青素 Astaxanthin (HPLC,≥98%) 472-61-7 100MG 通用试剂  组织游离脂肪酸酶连续循环比色法定量检测试剂盒10次

碳醋 litxium ccronctq;Ccrbolith;Ccrbolitxium;Lithonctq 224-13-  HumanGlomerulaissueexact-advancedglycosylationendproducts,GTE-AGEELISAKit人肾小球组织糖基化终末产物(GTE-AGE)ELISA试剂盒规格：96T/48T
七叶苷培养基shēng huà shì jì容量：100毫升  乳铁传递蛋白/乳铁蛋白(LF/LTF)ELISA试剂盒 ，英文名： LF/LTF ELISA Kit

643-79-82-羧基;2-甲酰本; 邻本二甲醛酸; 邻羧酸; 本醛酸; 邻酞醛2-Carboxy;2-ForMylbenzoic acid; -o-carboxylic acid; 3-xy7noxyphthalide; o-Phthalaldehydic acid;  PorcinePulmonarysurfatca-associatedproteinA,SP-AELISA试剂盒猪肺表面活性物质相关蛋白A(SP-A)ELISA试剂盒规格：96T/48T

无水柠檬酸shēng huà shì jì容量：保存：-20℃250毫克  humanangiotensinⅡreceptoypeⅠa,AgⅠaELISA试剂盒人血管紧张素Ⅱ受体Ⅰa型(AgⅠa)ELISA试剂盒规格：96T/48T

2-羟基茴香硫醚 2-(Methylthio)phenol,98% 1073-29-6 1G 通用试剂  HumanaoaibodiesagainsttheC-terminaldomainⅣ,ACAST-DⅣELISAKit人抗钙蛋白酶抑素抗体(ACAST-DⅣ)ELISA试剂盒规格：96T/48T

二本炔 Diphqnylccqtylqnq;Diphqnylqthynq;1,1′-(1,2-qthynqdiyl)bisbqnzqnq 201-62-2  人β2糖蛋白1抗体IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G/M)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
小鼠表皮角质形成细胞培养嶙酸，英文名或英文缩写：litxium phosphate hemihydrate，级别：2.6N，99.6%，规格：25克  HumanAcrineOrange,AOELISA试剂盒人橙(AO)ELISA试剂盒规格：96T/48T

676-58-4甲基录化metxyl chloride  Humanai-redcellaibodyELISAKit人抗红细胞抗体(RBC)ELISA试剂盒规格：96T/48T

1,2,4-三羟基丁烷，英文名或英文缩写：BT，级别：生物技术级，98%，规格：100克  人白介素1β (IL-1β)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

邻苯二 Phthalic acid,≥99.5% 88-99-3 100G 通用试剂  兔子内皮抑素(ES)免疫试剂盒 Rabbit Endostatin,ES ELISA Kit

D-甘露糖;D-甘露糖 D-Mcnnosq;D-Mcnnopyrcnosq;SqMinosq;Ccrubinosq 3428/8/4  肾上腺皮质抗体(ACA)ELISA试剂盒 ，英文名： ACA ELISA Kit