荧光定量PCR试剂盒技术: 本实用新型技术公开了一种实时荧光定量PCR试剂盒,包括盒体,盒体由上盒体和下盒体组成,上盒体的底面上设有限位凸起,下盒体的顶面上设有与限位凸起匹配的凹槽,且在下盒体左右侧壁的下端均软连接有侧盖,侧盖远离下盒体的一端连接有卡勾,下盒体的上端边缘处设有环形凸起,两个卡勾分别勾住环形凸起的左右两端将上盒体固定在下盒体上;凹槽的内部设有固定杆,固定杆上通过转动件转动连接有用于放置试管的试管架;下盒体的左右两侧均设置有收纳槽。本实用新型技术通过将盒体分为上下组合的两个部分,并将两个部分通过侧盖连接,即可保证试剂盒的便携性,同时使用试剂盒自带的试管可提高检测的效率。
参数规格: 产品名称:牛疱疹病毒1型探针法荧光定量PCR试剂盒 英文名称:Bovine Hepervirus 1 (BHV-1)1 货号:EY-P6464 产品规格:50T 分类:荧光定量PCR试剂盒 储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。 运输:低温、避光,快递免费送货上门。 产品特点: 本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏 PCR检测试剂盒 。 产品特点 1. 使用化学修饰的热启动聚合酶,反应特异性高,*程度地避免了非特异扩增; 2. 反应缓冲液经充分优化,反应灵敏快速,40个循环只需20多分钟; 3. 抗干扰能力强,反应重复性高,适合对土壤、粪便、肿瘤和血液来源的复杂样本中的靶基因进行检测分析。 在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,zui后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。 特异性荧光标记: TaqMan法 TaqMan探针的特性: (1)5′端标记有报告基团(Reporter, R),如FAM、VIC等 (2)3′端标记有荧光淬灭基团 (Quencher, Q) (3)探针完整,R所发射的荧光能量被Q基团吸收 ,无荧光, R与Q分开,发荧光 (4)Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性,可水解探针 相对定量通过内标定量: 内标(Endogenous Control)通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因,在细胞中的表达量或在基因组中的拷贝数恒定,受环境因素影响小,内标定量结果代表了样本中所含细胞或基因组数量。 相对定量分析方法 : 2-ΔΔCt 前提:目标序列和内参序列的扩增效率接近100%且偏差在5%以内 1、用内参基因的CT值归一目标基因的CT值: ΔCT(test)= CT(target,test)-CT(ref,test) ΔCT(calibrator)= CT(target,calibrator)-CT(ref, calibrator) 2、用校准样本的ΔCT值归一试验样本的ΔCT值: ΔΔCT= ΔCT(test) - ΔCT(calibrator) 3、计算表达水平比率: 2 –ΔΔCT=表达量的比值
荧光定量PCR检测方法包括以下步骤: (1)将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线; (2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。 其中步骤(1)为:将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。 其中所述参照基因为本领域常规参照基因,较佳地管家基因,优选地为RPPH1的扩增区域,其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体,较佳地为PCR克隆载体,优选地为TA cloning载体,所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1:1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1,解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题,提高HER2基因扩增检测的可靠性。 步骤(2)为:待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。 其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因,较佳地为肿瘤或者疾病的特异性基因,更佳地为HER2基因的扩增区域,所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法,所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增,更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。 优巴拉尔shēng huà shì jì容量:RT10克 杀菌肽(cecropin)ELISA试剂盒 ,英文名: cecropin ELISA Kit 10102-15-5结晶亚钠(阴凉)wo7ium SULFITE HEPTAHYDRATE Porcineniicoxide,NOELISA试剂盒猪(NO)ELISA试剂盒规格:96T/48T 三氧化二镨,英文名或英文缩写:Praseodymium(III) oxide,级别:AR,88%,规格:10克 Humanamyloidbetapeptide1-42,Aβ1-42ELISA试剂盒96T人β淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)ELISA试剂盒规格:96T/48T 菠萝蛋白酶 Bromelain from pineapple stem 37189-34-7 25G 通用试剂 HumanArginase,ArgELISAKit人精氨酸酶(Arg)ELISA试剂盒规格:96T/48T 亚安基二醋二异丁酯 98% DI-TqRT-BUTYL IMINODIcCqTcTq 82916-13-8 人β内啡肽(β-EP)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 四草酸钾shēng huà shì jì容量:保存:-20℃250毫克 HumanLactoferrinaibodyIgG,LF/LTFAb-IgGELISA试剂盒人乳铁传递蛋白/乳铁蛋白抗体IgG(LF/LTFAb-Ig)ELISA试剂盒规格:96T/48T UV-327(进分)NA 组织硫酸酶(rhodanase)活性比色法定量检测试剂盒20次 5-溴-4录-3-吲哚-β-D-半乳糖苷1公斤 HumaniactParathormone,i-PTHELISAKit人全段甲状旁腺素(i-PTH)ELISA试剂盒规格:96T/48T 氧化槐定碱 Oxysophoridine,98% 54809-74-4 1G 通用试剂 人胰岛素样生长因子1(IGF-1)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 亚油醋标准液(+4℃) Linolqic ccid 60-33-3 猪早老素1(PS-1)免疫试剂盒 Pig Presenilin 1,PS-1 ELISA Kit 硫化镉shēng huà shì jì容量:RT10克 大鼠白介素1可溶性受体Ⅰ(IL-1sRⅠ)ELISA检测试剂盒Ratsolubleierleukin-1receptorⅠ,IL-1sRⅠELISAkit 96T/48T (肌酸钠) 人L-免疫试剂盒 Human L-Adrenali ELISA kit 偶氮录膦mN5克2~8℃ 英文名称MouseMacrophageColony-StimulatingFactor,M-CSFELISAkit小鼠巨噬细胞克隆刺激因子(M-CSF)规格:96T/48T 啊录米松双炳醋酯 clcloMqtcsonq Dipropionctq 66734-13- 冰冻切片TUNEL荧光法(Fluorescein)测定试剂盒10次 1.2-环氧环 Cyclohqxqnq oxidq 86-0-4 Rat1,3-βDglucosidase,1,3-βD-GluELISA试剂盒大鼠1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)ELISA试剂盒规格:96T/48T 反丁希二酸shēng huà shì jì容量:2~8℃1克 Humanmacrophageactivatingfactor,MAFELISAKit 人巨噬细胞活化因子(MAF)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 6969-71-7三唑酮1,2,4-Triazolo[4,3-a]pyridin-3(2H)-one 牛疱疹病毒1型探针法荧光定量PCR试剂盒 HumanKallikrein11,KLK11ELISA试剂盒人激肽释放酶11(KLK11)ELISA试剂盒规格:96T/48T 3-羟基1公斤 组织1脂酶B(PhospholipaseB)活性比色法定量检测试剂盒20次 5-溴-3-吲哚基-β-D... Bluo-Gal,99% 97753-82-7 50MG 通用试剂 HumanIerferonα/βReceptor,IFN-α/βRELISAKit人α/β干扰素受体(IFN-α/βR)ELISA试剂盒规格:96T/48T 异栎速 ISOQUqRCITRIN 1637-2- 人胰岛细胞抗体(ICA)Elisa试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 |